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人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA实验操作步骤

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人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA实验操作步骤
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样品收集、处理及保存方法
1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
操作注意事项
1.  试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.  预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。
4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.  所有液体组分使用前充分摇匀。

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