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技术文章
李斯特菌动力生化试剂盒
点击次数：4283 发布时间：2020/3/23 13:44:08
李斯特菌动力生化试剂盒
HiMotility™Biochemical Kit for Listeria
| 货号 | 品名 | 规格 | 价格 |
| KBM003A | 李斯特菌动力生化试剂盒 | 5KT,10KT,20KT | 询价 |
概况
该试剂盒为标准化的显色检测系统，通过李斯特菌特异性的动力学、糖发酵和生化反应进行鉴定。微生物的发酵反应，引起培养基颜色发生变化。
用途
鉴定李斯特菌
使用说明
待鉴定菌种应先进行分离和纯化。可在PALCAM琼脂（货号：M1064）上挑取一个菌落，接种在５ml脑心浸膏肉汤（货号：M210）中，在35-37℃培养6-8小时，直到接种液浊度位于0.5-1.0McFarland标准之间。
无菌打开试剂盒，撕掉封条。划线接种第1孔，不要接种第2孔。接下来用接种环接种第3至第12孔。接种液应到达孔底部。在35℃-37℃孵育18-24小时。
结果判定
依据结果诠释表。在24-48小时孵育期结束后，在第4孔、第5孔和第6孔，分别添加如下试剂：
1) 动力试验+七叶苷水解试验：第1孔和第2孔
动力：有动力则菌落生长从第1孔转移到第2孔，伴随培养基变黑。
七叶苷水解：阳性则第1孔变黑，有动力则第2孔也变黑。
2）触酶试验：第3孔
用接种环刮取第1孔内表面，将接种环蘸到含3%H2O2的干净小试管中。
接种环表面冒泡为阳性。
接种环表面没有冒泡为阴性。
注意：3%的H2O2需新鲜配置。
3）硝酸盐还原试验：第4孔
加1-2滴对氨基苯磺酸（货号：R015）和1-2滴N,N-二甲基-1-萘胺（货号：R009）
立即出现粉红色为阳性
颜色无变化为阴性
4）伏-普试验：第5孔
加3-4滴Barritt试剂A(货号：R029)和1-2滴Barritt试剂B（货号：R030）
10分钟内出现粉红色为阳性
无颜色变化或有轻微变化为阴性。
5）甲基红试验：第6孔
加1-2滴甲基红试剂（货号：I007）
试剂保持红色为阳性
试剂脱色变黄为阴性
6）糖发酵试验：第7孔-第12孔
酸产生导致培养基颜色由红变黄，为阳性反应。
如果仍保持红色，则为阴性。
12种生化反应
| 1+2 | 动力试验+七叶苷水解试验 |
| 3 | 触酶试验 |
| 4 | 硝酸盐还原试验 |
| 5 | 伏普试验 |
| 6 | 甲基红试验 |
| 7 | 木糖发酵试验 |
| 8 | 乳糖发酵试验 |
| 9 | α-甲基-D-甘露糖苷 |
| 10 | 鼠李糖发酵试验 |
| 11 | 葡萄糖发酵试验 |
| 12 | 甘露醇发酵试验 |
鉴定的李斯特菌物种
格氏李斯特氏菌（Listeria grayi）
单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）
英诺克李斯特菌（Listeria innocua）
斯氏李斯特氏菌（Listeria seeligeri）
伊氏李斯特氏菌伊氏亚种（Listeria ivannovii Sub sp. ivannovii）
伊氏李斯特菌伦敦亚种（Listeria ivannovii Sub sp. londoniesis）
威氏李斯特氏菌（Listeria welshimeri）
储存条件及保质期
2℃-8℃；12个月
引用文献
1.Jitender Singh,etal. A Molecular Beacon-Based Duplex Real-Time Polymerase Chain ReactionAssay for Simultaneous Detection of Escherichia coli O157:H7 ａnd Listeriamonocytogenes in Milk ａnd Milk Products. Foodborne Pathogens andDisease. Dec 2009. 6(10). http://doi.org/10.1089/fpd.2009.0310.
2.Singh, J., Batish,V.K. & Grover, S. Molecular beacon based real-time PCR assay forsimultaneous detection of Listeria monocytogenes ａnd Salmonella spp. in dairyproducts. Dairy Science & Technol. (2011) 91: 373. https://doi.org/10.1007/s13594-011-0007-8
原创作者：北京缔一生物科技有限公司
