HEPES被视为可用于生物研究的通用缓冲液之一。[1]在生理pH下，该分子是两性离子的，并在pH 6.8至8.2下可有效作为缓冲剂。HEPES已用于一系列应用，包括组织培养。它常用于在空气中对细胞培养基进行缓冲。HEPES可用于Mg的体外实验。[2]

HEPES，又称 4-(2-羟乙基)哌嗪-1-乙烷磺酸，是一种两性离子N-取代氨基磺酸缓冲液。它在 pH 6.8-8.2 范围内有效，25°C 时 pKa 为 7.48。HEPES 是一种双性离子缓冲剂，是公认的万能缓冲剂之一，特别是在细胞生物学、生物化学和生物学研究中，HEPES 是一种不与大多数金属离子形成显著配合物的 Good′ 缓冲剂之一。这种性质使它适合作为金属离子溶液中的非配位缓冲剂。

HEPES 广泛应用于细胞培养，尽管细胞呼吸产生的二氧化碳浓度波动，但 HEPES 在维持生理 pH 值方面表现，这一特征在碳酸氢盐缓冲液中并不突出。它可以作为两性分离剂，在等电聚焦中产生 pH 梯度，与含有较少取代胺的缓冲液（如 Tris）相比，它对 DNA-限制性内切酶反应的干扰更小。除了这些应用之外，HEPES 还可以应用于各种生物和生化研究，包括免疫沉淀、细胞裂解和活细胞成像。通用性使其成为各种研究应用中不可或缺的工具。

HEPES已用于：

• 作为Danieau培养基中的一种成分，用于防止斑马鱼胚胎原肠胚形成后的黑色素形成[3]
• 作为Hank溶液中的一个组分用于铁的降解检测[4]
• 作为HEPES培养基中的一个组分用于细胞培养物的质粒转染[5]
• 与RPMI-1640、L-谷氨酰胺、FBS、丙酮酸钠和β-巯基乙醇用于大鼠胰岛瘤细胞的培养[6]
• 作为TCM199培养基中的一种补充剂用于核转移研究所需的新鲜卵母细胞洗涤[7]