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总胆固醇(TC)检测试剂盒(邻苯二甲醛比色法)

提供者:上海尚宝生物科技有限公司   发布时间:2022/5/31 11:15:44  阅读次数:97次  进入该公司店铺

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总胆固醇(TC)检测试剂盒(邻苯二甲醛比色法)

产品货号: BA1761

产品规格:60T

产品简介:

胆固醇(Cholesterol)又称胆甾醇,是一种环戊烷多氢菲的衍生物,分子式C27H46O。胆固醇广泛存在于动物体内,其中脑、神经组织丰富,在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也较高。总胆固醇(TC)检测试剂盒(邻苯二甲醛比色法)检测原理是胆固醇及其脂,在强酸存在下与邻苯二甲醛反应,产生紫红色化合物,该化合物在550nm波长处有吸收峰,分光光度计在550nm处进行比色测定,胆固醇含量在4mg/ml之内与吸光度呈良好线性关系。本试剂盒用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的总胆固醇含量定量测定。

产品组成:

产品名称

60T

保存条件

试剂(A):胆固醇标准(1mg/ml)

1ml

4℃ 避光

试剂(B):TC assay buffer

100ml

室温

试剂(C):邻苯二甲醛粉剂

2×10mg

4℃ 避光

试剂(D):邻苯二甲醛稀释液

30ml

室温

操作步骤(仅供参考):

1. 样本处理:

①血清、血浆、脑脊液样本:从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如超过线性范围,用生理盐水稀释后检测。

②细胞样本:

a、取适量的细胞(一般推荐>106以上),离心,弃上清,留取沉淀。

b、用PBS或生理盐水清洗1~2次,离心,弃上清,留取沉淀。

c、加入PBS或生理盐水匀浆,冰浴条件下超声破碎细胞,功率300W,每次3~5s,间隔30s,重复3~5次。

③组织样本:准确称取适量组织样本,按质量(g):生理盐水=的比例,加入生理盐水,冰浴条件下手动或机械匀浆。离心,取上清待用。

2. 配制胆固醇标准工作液:按胆固醇标准(1mg/ml):TCassaybuffer的比例准确混合,即为胆固醇标准工作液(0.1mg/ml),然后按下表依次稀释胆固醇标准工作液。

加入试剂(ml)/管号

0

1

2

3

4

胆固醇标准工作液(0.1mg/ml)

0

0.06

0.12

0.18

0.24

TC assay bufer

0.24

0.18

0.12

0.06

0

总胆固醇浓度(mg/ml)

0

1

2

3

4

3. 配制邻苯二甲醛工作液:取1瓶(10mg)邻苯二甲醛粉剂的准确加入邻苯二甲醛稀释液1,充分混匀,即为邻苯二甲醛工作液。4℃避光保存,2周有效。 

4. 配制强酸工作液:取适量的TC assay buffer和浓硫酸等量混合,即为强酸工作液。注意:本试剂盒不提供浓硫酸,需用户自备。二者混合时,一定小心操作,以免误伤自己。配制好的强酸工作液工作液中的硫酸含量应准确,否则有可能影响显色效果。 

5. 分光光度计胆固醇测定操作: 

①按下表依次加入试剂:

加入试剂(ml)

空白管

标准管

待测管

蒸馏水

0.006

系列胆固醇标准工作液

0.006

待测血清或其他样本

0.006

TC assay buffer

024

0.24

0.24

邻苯二甲醛工作液

0.12

0.12

0.12

强酸工作液

2.4

2.4

2.4

②充分混匀, 静置。 

③以分光光度计,1cm比色杯测定550m吸光度,以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。 

 

计算: 以吸光度为纵坐标,以胆固醇浓度为横坐标,作标准曲线。对照标准曲线即知待测样本的浓度。

注意事项:

1. 上述低温试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降。 

2. 本法可直接用于检测脑脊液中的TC含量,也可直接检测尿液中的TC含量。 

3. 待测样本如不能及时测定,应置于2~8℃保存,3天内稳定。 

4. 如果样本TC浓度过高,结果可能呈假性降低,应用生理盐水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。

有效期:6个月有效。

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