产品介绍

AF594 ECL是将从刺桐（Erythrina Cristagalli）种子中天然提取纯化的刺桐凝集素，与Alexa Fluor 594荧光染料通过温和的酰胺化共价偶联工艺制备而成的糖链特异性远红前区标记科研试剂。它完整保留了刺桐凝集素对β-D-半乳糖与N-乙酰半乳糖胺残基的高亲和力识别特性，依托Alexa Fluor 594染料优化的氧杂蒽多甲川骨架，兼具极高的光漂白抗性与的水溶性，全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料，解决了传统罗丹明红染料标记凝集素光稳定性差、长时间成像信号衰减严重的痛点。试剂为深红色至暗橙色冻干品，在中性生理缓冲液中溶解分散性，是远红前区开展长时间糖链成像的标杆级抗淬灭工具。

基础参数

中文名称：AF594标记刺桐凝集素，AF594-刺桐凝集素

英文名称：AF 594 ECL，Alexa Fluor594-ECL，AF594-Erythrina Cristagalli Lectin

外观状态：深红色至暗橙色冻干品

荧光光谱参数：最大激发波长约590 nm，发射波长约617 nm，完美适配561 nm/594 nm激光线与Cy3/Cy5之间的标准远红前区滤光片组

储存条件：-20℃避光密封干燥长期保存，避免反复冻融，复溶后建议分装为单次使用量，2–8℃避光短期可稳定存放，操作全程避免接触高浓度强氧化剂，防止荧光基团发生不可逆破坏

用途：半乳糖类糖链远红前区荧光标记，长时间共聚焦连续成像，厚组织样本深层成像，多色实验中间通道搭建

作用机理

AF594 ECL中的刺桐凝集素以天然活性二聚体形式存在，每个亚基的糖结合口袋通过Asp/Glu残基构成的氢键网络，配位靶标糖链上的半乳糖与N-乙酰半乳糖胺残基，对该类特征糖基化修饰具有高选择性。AF594荧光基团通过稳定的酰胺键锚定在ECL蛋白表面的赖氨酸残基上，标记位点远离蛋白核心糖结合口袋，偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在590nm波长激发下，偶联在蛋白上的AF594基团可发射出明亮的617nm远红前区荧光，该波段的光散射效应远低于短波长荧光，在厚组织样本中可以实现更深的成像穿透深度。

核心产品优势

AF594 ECL的核心差异化优势集中在远红前区的超高抗淬灭综合表现上，相比传统同波段标记的同类凝集素，AF594染料的光稳定性大幅提升，连续30分钟激光照射下荧光信号衰减幅度小于8%，远优于传统罗丹明类染料，特别适合长时间连续成像实验。试剂经过严格的游离染料去除工艺，游离染料残留低于2%，非特异性吸附极低，同时其发射波段处于绿光与远红光之间的空白窗口，光谱串扰极低，是多色实验中搭建中间通道的理想选择，也是远红前区开展长时间糖链成像的标杆级抗淬灭工具。

应用领域

AF594 ECL可用于长时间共聚焦连续成像，依托其的抗光漂白特性，在共聚焦显微镜下对活细胞或固定组织进行长时间连续扫描，追踪糖链在细胞动态过程中的分布变化，全程信号无明显衰减。该试剂可应用于厚组织样本深层成像，远红前区荧光的光散射少，穿透深度远高于短波长荧光，可在几十微米厚度的组织切片中清晰观察深层细胞的靶标糖链分布，获得完整的三维空间分布信息。同时它也适用于高维度多色实验搭建，作为独立的远红前区通道探针，与蓝光、绿光、橙光、远红光探针联合使用，轻松搭建5色及以上的多色荧光体系，大幅提升单样本的靶标检测维度，为糖生物学相关非医疗方向研究提供高稳定性的成像工具。

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