高结合力和中结合力ELISA板条的适用范围分别是什么?

高结合力板条（300–400 ng IgG/cm²，适合＞10 kD 蛋白）

适合追求高包被量、高灵敏度的实验，是试剂盒开发最常用的起步选择：

夹心 ELISA、间接 ELISA、竞争 ELISA，尤其是待测物浓度低、需要强信号的项目（细胞因子、低丰度抗原、微量抗体检测）

包被原料有限、只能用较低包被浓度的纯化抗体 / 重组抗原

化学发光 ELISA、荧光免疫等需要高信号的体系

小分子肽、偏小分子量蛋白（10–20 kD）被动吸附包被

缺点：更容易出现非特异吸附，一般要用蛋白封闭（BSA、脱脂奶），单纯去污剂封闭效果差

中结合力板条（200–300 ng IgG/cm²，适合＞20 kD 大分子蛋白）

表面以疏水吸附为主，结合更温和，优势是更容易压低背景、提升信噪比：

基质复杂样本（血清、血浆、细胞上清）的常规 ELISA，降低基质带来的非特异干扰

粗提抗原、未纯化血清多克隆抗体包被，减少杂蛋白非特异性吸附

蛋白本身疏水较强、自身吸附能力很好，不需要强活化表面

可以用 Tween 等非离子去污剂辅助封闭，封闭方案更灵活

部分酶活结合实验、抗原表位筛选、抗体效价筛查

缺点：包被上限低，不适合低浓度、小分子肽的包被，灵敏度上限不如高结合力板

快速选型口诀

目标物浓度低、蛋白偏小、要高信号 → 高结合力样本基质复杂、粗抗原 / 粗血清、背景压不住、大分子蛋白 → 中结合力