做乳腺癌、雌激素受体或者内分泌治疗方向的同学，MCF-7 几乎是入门必用的一株。它是雌激素受体（ER）阳性的经典乳腺癌细胞，激素依赖型乳腺癌研究的标准模型。

MCF-7 是人乳腺癌细胞，从一名 69 岁白人女性转移性腺癌患者的乳腺组织中分离。它表达雌激素受体（ER），表达 IGFBP-2/4/5 等基因，可用于 3D 培养、免疫肿瘤学和乳腺癌研究，也是合适的转染宿主。

细胞背景与来源

来源：人，转移性乳腺癌（69 岁白人女性）。贴壁生长，可能形成松散细胞簇，逐渐铺成单层；密度大时会堆叠起来，属正常。

应用场景与研究价值

•乳腺癌研究：激素依赖型乳腺癌、雌激素受体信号与内分泌治疗机制。

•耐药研究：他莫昔芬等内分泌治疗耐药模型。

•3D 培养与转染宿主。

培养特性与注意事项

培养基：EMEM（MEM + NEAA）+ 10% FBS + 10 μg/mL 胰岛素 + 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。生长较慢，1:2 传代约 4-5 天到 80% 融合，接种别太稀。

传代：PBS 润洗后胰酶 37℃ 消化，回缩、间隙变大但未脱落时加完全培养基终止，别强行吹下；1000 rpm 离心 3 min；推荐 1:2，接种后镜下确认分散成单颗。换液 2 天一次。

冻存：92% FBS + 8% DMSO（或 92% 完全培养基 + 8% DMSO），程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏：37℃ 水浴 2 min 内，150g 离心 2 min。生物安全：BSL-1，人源细胞建议按 BSL-2 防护操作。

注意：贴壁较慢，复苏/传代后要 48-72 h 才完全贴壁，至少 48 h 再换液；堆叠聚集是正常现象，传代时消化别太短、尽量分散成单颗；漂浮的活细胞可离心回收接回原瓶，贴壁多时可舍弃；黑点多用预热 PBS 轻润洗。

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