如何判断样本基质是否复杂？

判断样本基质是否复杂，主要看样本里除目标检测物以外，共存的干扰组分种类、浓度以及这些组分会不会直接干扰 ELISA 的吸附、抗原抗体结合或者显色读数。血清和血浆属于典型的复杂基质，里面含有大量白蛋白、球蛋白、脂蛋白、补体、溶血释放的血红蛋白、脂类，还有异嗜性抗体、类风湿因子这类会造成假阳性或者高背景的物质。腹水、细胞培养上清、组织匀浆、乳汁、尿液、全血裂解物也属于复杂基质，组织匀浆里还有大量蛋白酶、核酸、脂类和杂蛋白，细胞上清含有培养基蛋白、细胞碎片和分泌的多种杂蛋白。相对简单的基质一般是纯化蛋白稀释液、重组蛋白在 PBS 或者碳酸盐缓冲液中的稀释样本，这类样本杂质很少，几乎没有内源性干扰物质。

也可以结合预实验现象辅助判断，同一标准品分别用缓冲液稀释和用该基质稀释，如果基质稀释后的空白孔 OD 明显高于缓冲液空白，标准品信号压低或者漂移，复孔之间变异明显变大，就说明这个基质复杂。如果存在明显溶血、脂血、黄疸，样本本身自带色素或者浑浊，也直接判定为复杂基质，这类样本除了蛋白非特异吸附，还会带来本底吸光度干扰。还有一个参考角度，间接法、竞争法体系本身更容易受基质影响，即使是普通血清，在这类方法里也需要按照复杂基质对待，夹心法抗干扰能力相对更强，但也不能忽视异嗜性抗体的干扰。

简单来说，只要样本不是经过纯化、只有目标物和基础缓冲盐溶液，而是来源于生物体液或者组织粗提物，基本都归类为复杂基质，实验上优先考虑中结合力板条，同时搭配基质匹配的稀释液、封闭液以及必要的基质前处理。