本方案围绕“样品前处理—甲酯化—色谱分离—定性定量”建立完整检测路径。前处理阶段，乳粉和固态样品需充分混匀，含油脂样品行酸水解或碱水解，再通过溶剂萃取获得脂肪组分；液态乳样可根据基质选择直接甲酯化或提取后甲酯化。

甲酯化环节可采用氢氧化钾-甲醇法、乙酰氯-甲醇法或-甲醇法。对于乳品和婴幼儿配方粉，乙酰氯-甲醇法在脂肪酸回收和重复性方面表现较好；氢氧化钾-甲醇法操作相对简便，适合常规油脂样品。

色谱分离建议使用100m强极性毛细管柱，例如SP-2560、CP-Sil 88、HP-88或性能相当色谱柱。程序升温需兼顾顺式与反式脂肪酸异构体的分离度，重点观察C18:1反式峰组与相邻顺式峰的分辨情况。

定量可采用面积归一化法、外标法或内标法。若需提高低含量反式脂肪酸的准确性，可配合脂肪酸甲酯标准品进行保留时间确证和峰面积校正。