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髓系白血病研究常用株MV-4-11,悬浮养法要注意密度

提供者:武汉尚恩生物技术有限公司   发布时间:2026/10/12 14:07:59  阅读次数:43次  进入该公司店铺

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做急性髓系白血病(AML)尤其是 FLT3-ITD 突变方向的同学,MV-4-11 是绕不开的一株。它是携带 FLT3 内部串联重复突变的重要模型,FLT3 抑制剂筛选几乎都用它。

MV-4-11 是人髓性单核细胞白血病细胞,由 Rovera 课题组从一名 10 岁双表型髓性单核细胞白血病男孩的外周血建立。IL-3 可独立支持其长期生长;10% FBS 培养时无需额外加 IL-3。可用于 3D 培养、免疫紊乱与免疫学研究,也是合适的转染宿主。

细胞背景与来源

来源:人,外周血(双表型髓性单核细胞白血病)。悬浮生长,圆形,偶有小聚团(正常,无需吹散),少量贴壁细胞可丢弃。

应用场景与研究价值

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•白血病研究:AML 发生机制、FLT3-ITD 突变与靶向治疗研究。

•药物筛选:FLT3 抑制剂等抗白血病药物的活性评价。

•免疫学:细胞因子(IL-3、GM-CSF、G-CSF)对增殖的调控研究。

培养特性与注意事项

培养基:IMDM + 10% FBS + 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。对血清要求高,建议用进口优质血清;有密度依赖性,密度低时增殖慢,推荐维持在 50-100 万细胞/mL。

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传代/换液:对离心敏感,常规扩增别频繁离心。密度到 100 万细胞/mL 按 1:2 传代,可混匀后直接分瓶补足培养基;换液用半换液法。离心 900-1000 rpm、3 min。

冻存:92% FBS + 8% DMSO(或 92% 完全培养基 + 8% DMSO),密度 200-300 万细胞/mL/管,程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏:37℃ 水浴 2 min 内,900-1000 rpm 离心 2 min。生物安全:BSL-1,人源细胞建议按 BSL-2 防护操作。

注意:偶有小聚团正常,别吹散;碎片多时密度高时低速离心(900 rpm、3 min)去除,密度低时别离心;悬浮细胞偏脆弱,吹打轻、离心转速别太高。

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