Triton-NH4OH细胞裂解液实验操作步骤！
细胞的行为受基质调控，细胞在基质上附着、迁移和增殖，因此组织培养的表面包被胞外基质或单独的胞外基质组分可以更好的模拟细胞在体内生长的微环境，促进细胞的黏附、增殖并表现出分化的能力。多种成分均可以从细胞中提取细胞外基质，如Triton、SDS、NP-40等。Triton-NH4OH细胞裂解液是采用一种非变性裂解方法来温和裂解细胞，用于制备包括胶原、蛋白聚糖、层连蛋白、纤连蛋白、接触素、弹性纤维等在内的细胞外基质。
riton-NH4OH细胞裂解液(Triton-NH4OHLysisBuffer)主要由PBS、TritonX-100和NH4OH等组成，经过除菌处理。Triton-NH4OHLysisBuffer处理过的细胞样品所得胞外基质组分可用于后续的细胞培养等实验。
操作步骤（仅供参考）：
1.制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清。
2.裂解: 加入3～5倍细胞沉淀体积的Triton-NH4OH Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解。本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
3.离心: 4℃，离心5min，弃红色上清。如无低温离心机，本步骤亦可在室温下操作。
4.如果发现红细胞裂解不wan全，可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5.洗涤：根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀重悬沉淀。4℃，离心2～3min，弃上清，该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应于细胞沉淀体积的5倍以上。
6.如有必要，重复上述步骤5一次，共洗涤1～2次。
7.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
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