技巧三：给药深度与角度——2-4mm是黄金插入区间

针头插入深度直接决定药物沉积部位。对小鼠而言，插入鼻腔内2-4mm为最佳区间：

• 插入过浅，药物主要沉积于鼻前庭，难以到达深部嗅区；

• 插入过深，则可能损伤鼻腔黏膜甚至筛骨，引发出血和动物应激。

除深度外，插入角度同样关键：

• 若以嗅区为靶向，针头应沿鼻腔背侧方向进入，以到达上鼻道和嗅上皮区域；

• 角度过低则会使药物进入腹侧鼻道，大幅降低脑部递送效率。给药时应迅速按下推杆（可由两人协作完成），使药物在动物一次吸气动作中完成雾化递送。

图4：大小鼠通用雾化针头

小鼠每侧鼻孔给药体积建议不超过10-12μL，总体积控制在25μL以内；体积过大易导致药液经咽喉流入胃部，降低鼻腔靶向效率。

技巧四：麻醉深度与动物固定——状态直接影响结果

麻醉方式与深度直接影响给药效率。异氟烷吸入麻醉起效快、恢复快，是较为常用的选择，但需注意麻醉过深会抑制呼吸，进而影响药物吸入；注射麻醉维持时间较长，但呼吸抑制作用更为明显。

• 固定动物时，用手抓住麻醉小鼠的颈部后轻轻提起，将动物尾巴缠绕在握持手的小手指上，以稳固固定头部。

• 保持头部略微后仰的姿势，使鼻腔通道与地面形成一定角度，有利于雾粒向鼻腔深部沉积。

• 给药后继续保持头部向上姿势30-60秒，防止药液流出。

对于应激敏感的实验（如联合行为学检测），建议在给药前对动物进行固定器适应训练，以降低应激水平。