本试剂盒仅供研究使用。

使用目的：本试剂盒用于测定样本中对甲氧基肉桂酸的含量。

实验原理本试剂盒应用酶联免疫竞争法测定标本中对甲氧基肉桂酸水平。用纯化的对甲氧基肉桂酸抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入对甲氧基肉桂酸，和HRP标记的对甲氧基肉桂酸抗原，使它们竞争结合，，经过洗涤后加底物TMB显色。样本颜色的深浅和样品中的对甲氧基肉桂酸的含量呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中对甲氧基肉桂酸的含量。

试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶8标准品S1（16ng/mL）0.5ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶标准品S2（8ng/mL）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条标准品S3（4ng/mL）0.5ml×1瓶4显色剂A液6ml×1瓶标准品S4（2ng/mL）0.5ml×1瓶5显色剂B液6ml×1瓶标准品S5（1ng/mL）0.5ml×1瓶6终止液6ml×1/瓶9说明书1份7样品稀释液6ml×1/瓶10封板膜2张

标本要求1．标本处理：（1）水样采集后经-20℃反复冻融三次，再经玻璃纤维过滤后，备查（2）组织样品用丁醇：甲醇：水(5：25：70 V：V：V)抽提，或按相关文献提取进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，备查2．不能检测含 NaN3 的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.加样：分别设标准孔、空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上标准孔中加50微升，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。2.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育 60分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟.27.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。8.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。

检测范围：0.3ng/mL -18ng/mL

规格：96份/盒

保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃。

2．有效期：6个月