提供者:常州市幸运电子设备有限公司 发布时间:2026/4/12 9:49:02 阅读次数:38次 进入该公司店铺
通常在荧光显微镜下拍摄微弱的荧光影像是一个较大的问题,也是迄今为止显微镜厂家和影像采集装置制造者始终努力探求改善的一个重要内容。同时,也不断有新的装置在出现。
滤色系统是荧光显微镜的重要部位,由激发滤板和压制滤板组成。
一、激发滤板
根据光源和荧光色素的特点,可选用以下三类激发滤板,提供一定波长范围的激发光。
1、紫外光激发滤板:此滤板可使400nm以下的紫外光透过,阻挡400nm以上的可见光通过。常用型号为UG-1或UG-5,外加一块BG-38,以除去红色尾波。
2、紫外蓝光激发滤板:此滤板可使300~450nm范围内的光通过。常用型号为ZB-2或ZB-3,外加BG-38。
3、紫蓝光激发滤板:它可使350~490nm的光通过。常用型号为QB24(BG12)。
zui大吸收峰在500nm以上者的荧光素(如罗达明色素)可用蓝绿滤板激发。近年开始采用金属膜干涉滤板,由于针对性强,波长适当,因而激发效果比较玻璃滤更好。
激发滤板分薄厚两种,一般暗视野选用薄滤板,亮视野荧光显微镜可选用厚一些。基本要求是以获得zui明亮的荧光和的背景为准。
二、压制滤板
压制滤板的作用是*阻挡激发光通过,提供相应滤长范围的荧光。与激发滤板相对应,常用以下3种压制滤板:
1、紫外光压制滤板:可通过可见光、阻挡紫外光通过。能与UG-1或UG-5组合。常用GG-3K430或GG-6K460。
2、紫蓝光压制滤板:能通过510nm以上滤长的荧光(绿到红),能与BG-12组合。通常用OG-4K510或OG-1K530。
3、紫外紫光压制滤板:能通过460nm以上波长的荧光(蓝到红),可与BG-3组合,常用OG-11K470AK 490,K510。
那我们应该怎样做呢?
1)应尽量完善的样本的制备;
2)应清洗干净的样品载体,如载玻片,盖玻片等,以近一步消除不必要的杂荧光干扰;
3)应尽量选取高质量的荧光显微镜;
4)应合理使用适合不同荧光光谱的荧光物镜;
5)应选取zui合适的激发光源;
6)应选取高敏感度和大动态范围的CCD,也可用EMCCD等;
7)摄像头的调整可适当增加增益,但应尽量避免产生因其引起的信噪比降低等问题。建议可用过滤的方法近一步消除噪音信号;此外,在降低摄像头的分辨率问题上,很多使用者往往在拍摄荧光影像时,也会使用很高的分辨率,在通常情况下这是不常被推荐方法的。
8)可适当增加曝光时间,同时也要注意时间延长对荧光样品的淬灭影响,建议可使用一些抗淬灭剂;
9)更应注意降低拍摄环境的光线干扰,如背景光等,这也是非常值得注意的。
荧光显微镜
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