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​RAW 264.7细胞(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)攻略

提供者:上海雅吉生物科技有限公司   发布时间:2026/3/10 11:15:01  阅读次数:1025次  进入该公司店铺

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RAW 264.7细胞是从Abelson小鼠白血病病毒(MuLV)诱导的肿瘤中建立的雄性小鼠巨噬细胞细胞系,Raschke等人于1976年报道了该细胞系。RAW 264.7细胞sIg-、Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原阴性。RAW 264.7细胞不分泌可检测到的病毒颗粒,XC斑点形成试验阴性。根据Janet W.Hartley博士在2008年发表的一项研究,RAW 264.7细胞被证明表达生态性和多向性MuLV,并且使用XC噬斑试验对病毒复制呈阳性。RAW 264.7细胞可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖,并且可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。LPS或PPD处理2天可诱导RAW 264.7细胞分解红血球,但对肿瘤靶细胞无作用。RAW 264.7细胞易于繁殖,DNA转染效率高,对RNA干扰敏感,并支持小鼠诺如病毒的复制,可以用于3D细胞培养、免疫系统紊乱和免疫学研究,也是一种合适的转染宿主。


RAW264.7细胞培养注意事项

1. 存在少量分化细胞

RAW264.7细胞形态主要为圆形。因其对环境非常敏感,在培养时会出现少量短梭形或多角形的分化细胞,这是正常现象。分化的细胞贴壁牢固,而未分化的细胞贴壁松散。根据贴壁松紧差异,可将未分化的细胞吹下,并转移至新的培养器皿中进行培养。


2. 对胰酶敏感

RAW264.7细胞对胰蛋白酶敏感,接触胰酶后将很快发生自发分化,贴壁变紧,很难消化下来。所以不建议用胰酶对该细胞进行传代。(详细传代步骤见下文)


3. 生长较快

RAW264.7细胞生长速度较快,建议每天观察细胞密度,当细胞密度到达80%时及时进行传代,以防细胞过度生长状态变差。

RAW264.7细胞传代方法

1.准备所需的培养基、胰酶、PBS、离心管、培养瓶以及无菌枪头等;(试剂提前预热)

2. 轻轻吸走培养上清,留 2-3mL 培养基轻轻吹打细胞面吹下细胞;

2. 将细胞悬液转移至离心管,900rpm 离心 3-5min,弃上清;

3. 加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;

4. 补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养。


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