如何保证移液器的准确性和精度?

要保证间接 ELISA 实验中移液器的准确性（移液体积与设定值的吻合程度）和精度（多次移液体积的一致性），需从校准、耗材匹配、操作规范、维护保养四个方面建立全流程管控，具体措施如下：

定期开展专业校准

称重法（实验室常用）：在 20–25℃环境下，用分析天平称量移液器吸取去离子水的重量，通过公式 体积 = 重量 / 密度 计算实际移液体积，对比设定值计算误差和变异系数（CV 值），要求误差≤±1%、CV 值≤0.5%。

精密实验可使用移液器校准仪，直接读取移液体积的准确性和精度数据，校准结果需记录存档。

校准频率：日常实验用移液器每 3–6 个月校准 1 次；频繁使用、高温 / 低温环境下使用的移液器，需缩短至每月校准 1 次；维修或更换部件后必须重新校准。

校准方法

校准范围：覆盖实验中常用的体积档位，例如 ELISA 实验常用的 10 μL、50 μL、100 μL、200 μL，避免仅校准单一档位。

确保移液器与耗材的适配性

吸头匹配：必须选用与移液器品牌、型号适配的吸头，吸头需能紧密贴合移液器枪头，避免因密封不严导致漏液或吸液不足；严禁混用不同品牌、规格的吸头。

吸头质量把控：选择无酶、无热源的优质吸头，吸头尖端需平整无毛刺，防止吸液时残留液体或出液方向偏移；一次性吸头禁止重复使用。

规范移液操作手法

排液时吸头尖端紧贴容器内壁，先按压至档排空液体，再按压至第二档排出残留液体，确保移液体积准确。

ELISA 加样时，保持吸头垂直对准孔中心，控制出液速度，避免液体飞溅或挂壁。

按压移液器按钮至档（切勿直接按至第二档），将吸头垂直浸入液面下 2–3 mm，缓慢松开按钮吸取液体，避免产生气泡。

吸液后将吸头沿容器壁轻靠一下，去除外壁残留液体，防止体积误差。

吸液操作

排液操作

避免常见误区：严禁横握移液器（防止液体倒流腐蚀内部部件）；吸液时避免吸头浸入过深或过浅；高黏度试剂（如血清、浓缩抗体）需适当放慢吸液和排液速度。

做好日常维护与保养

清洁消毒：实验后及时擦拭移液器外壁；接触过腐蚀性试剂、生物样品后，需拆卸枪头圆锥部分，用 75% 乙醇擦拭消毒，晾干后重新组装。

部件更换：定期检查移液器的密封圈、弹簧、活塞等易损部件，发现老化、变形及时更换，防止因部件磨损导致移液精度下降。

存放规范：移液器需竖直悬挂在专用支架上，避免平放或重压；长期不用时，需调至最大量程，防止弹簧疲劳失效。