提供者:上海酶际生物科技有限公司 发布时间:2025/11/14 13:46:12 阅读次数:74次 进入该公司店铺
猪ELISA试剂盒的加标回收率控制主要通过以下方法实现:
1.加标方法选择
方法一(前处理时加标):在样本前处理阶段加入标准液,适用于基质效应较小的样本。需对同一样本的高、中、低三个浓度回收率取平均值作为最终结果。
方法二(前处理后加标):样本前处理完成后加入标准液,可避免前处理步骤的干扰。需取3个不同样本,每个样本做平行样,低浓度取3个样本回收率的平均值,中、高浓度分别取对应浓度的回收率。
2.加标量控制
加标体积需≤原样本体积的10%,避免基质效应影响。
加标浓度应覆盖预期检测范围,低浓度样本需避免前滞效应,高浓度样本需避免钩状效应。
3.实验操作规范
使用jing准移液器(系统误差≤2%),遵循“一头一换"原则防止交叉污染。
确保试剂温度平衡至室温(20-25℃),避免温度不均导致结果偏差。
4.结果计算与验证
回收率公式:回收率= (测定回收样本浓度均值 - 测定基础样本浓度均值) / 加入浓度 × 100%。
合格标准:平均回收率应在80%-120%之间,板内/板间变异系数(CV)分别<10%和<15%。
注意事项:基础样本需用不含待测物的基质液稀释,确保结果准确性。若回收率异常,需检查样本基质干扰或优化稀释比例。
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