标题：CF594 ConA

【参数信息】

英文名称：CF594 Concanavalin A ；CF594 ConA

中文名称：CF594标记刀豆蛋白A；荧光探针CF594-刀豆蛋白A

激发波长：593 nm

发射波长：614 nm

外观：液体

纯度：≥95%

储存条件：-20℃避光干燥

生产厂商：西安强化生物科技

【简单概述】

CF594 belongs to a deep red fluorescent group, whose excitation wavelength is 593 nm and emission wavelength is 614 nm. It has high brightness, excellent light stability and water solubility, which is suitable for fluorescence microscopy, flow cytometry and super-resolution imaging.

ConA is a plant lectin extracted from jack bean (Canavalia ensiｆormis), which can specifically recognize and bind to α-D-mannose (α-D-mannose) and α-D-glucose (α-D-glucose) residues. These glycosyl groups are widely present in the glycoproteins and glycolipids on the surface of eukaryotic cells.

The coupling of CF594 and ConA combines the fluorescence characteristics of dye with the specific binding of lectin to sugar, providing an efficient tool for the study of cell surface glycosylation.

CF594属于深红色荧光基团，其激发波长为593 nm，发射波长为614 nm，具有高亮度、的光稳定性和水溶性，适用于荧光显微镜、流式细胞术及超分辨率成像等场景。

ConA是一种从刀豆（Canavalia ensiｆormis）中提取的植物凝集素，能特异性识别并结合α-D-甘露糖（α-D-mannose）和α-D-葡萄糖（α-D-glucose）残基，这类糖基广泛存在于真核细胞表面的糖蛋白和糖脂中。

CF594与ConA的偶联结合了染料的荧光特性与凝集素的糖结合特异性，为细胞表面糖基化研究提供了高效工具。

【CF594 ConA用于多重荧光检测的方法和步骤是什么？】

（一）试剂准备

CF594-ConA溶液配制：将CF594-ConA冻干粉溶解于无菌PBS或去离子水中，配制成工作浓度（通常为1–10 µg/mL），避光保存。

封闭液：使用含1% BSA的PBS，减少非特异性结合。

洗涤缓冲液：PBS或TBS（pH 7.4）。

多重标记试剂：根据需要准备其他荧光标记物（如CF488、Alexa Fluor 647等），确保光谱不重叠。

（二）样本处理与染色步骤

样本固定（可选）：

细胞或组织切片用4%多聚甲醛固定15分钟，后用PBS洗涤3次。

封闭：

加入封闭液（1% BSA-PBS），室温孵育30分钟，阻断非特异性位点。

CF594-ConA孵育：

滴加CF594-ConA工作液覆盖样本，室温避光孵育30–60分钟。

洗涤：

用PBS洗涤3次，每次5分钟，去除未结合的探针。

多重荧光标记（如同时检测其他靶点）：

根据需要加入其他一抗（如抗目标蛋白抗体），孵育后再用对应荧光二抗（如CF488标记的二抗）处理，注意顺序和避光条件。

封片与观察：

用抗淬灭封片剂（如DAPI封片剂）封片，立即用荧光显微镜或共聚焦显微镜观察。CF594的激发/发射波长约为590 nm/617 nm，需选择合适滤光片。

（三）关键注意事项

光谱分离：CF594为橙红色荧光，需与绿色（如CF488）、远红色（如CF647）荧光搭配，避免串色。

对照设置：包括阴性对照（不加CF594-ConA）和竞争抑制对照（用过量游离甘露糖预处理，验证特异性结合）。

避光操作：全程避光以防荧光淬灭。

（四）应用示例

自噬研究：在植物组织中，CF594-ConA可标记自噬体，需配合ConA浸润（1 µM ConA溶液处理36小时）及饥饿诱导，后通过共聚焦显微镜观察荧光 puncta。

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本试剂仅适用于科研实验，敬请知悉。