间接ELISA实验中，常见的非特异性反应有哪些？

间接 ELISA 实验中常见的非特异性反应主要由标本因素和试剂因素导致，具体如下：

标本中的非特异性物质引起的反应

类风湿因子：人血清中 IgM、IgG 型类风湿因子（RF）可以与 ELISA 系统中的捕捉抗体及酶标记二抗的 FC 段直接结合，从而导致假阳性。

补体：ELISA 系统中固相一抗和标记二抗过程中，抗体分子发生变构，其 FC 段的补体 C1q 分子结合位点被暴露出来，使 C1q 可以将二者连接起来，造成假阳性。

嗜异性抗体：人类血清中含有能与啮齿类动物（如鼠等）Ig (s) 结合的天然嗜异性抗体，可将 ELISA 系统中一抗和二抗连接起来，产生非特异性结合，造成假阳性。

嗜靶抗原的自身抗体：抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体，有时能与靶抗原结合形成复合物，在 ELISA 方法中均可干扰抗原抗体测定结果，导致非特异性反应。

医源性诱导的抗鼠 Ig (s) 抗体：临床用鼠源性单克隆抗体治疗、放射性同位素标记鼠源性抗体的影像诊断及靶向治疗等，可能使病人体内产生抗鼠抗体，被鼠等啮齿类动物咬伤的病人也可能产生抗鼠 Ig (s) 抗体，这些抗体在 ELISA 测定时均可产生假阳性。

交叉反应物质：类 di 高辛、类 AFP 样物质等与靶抗原有交叉反应的物质，在用单克隆抗体测定抗原时，若交叉抗原决定簇正好是所用单克隆抗体相对应的靶决定簇时，会出现假阳性结果。

标本中其它成分：血清脂质过高、胆红素、血红蛋白及粘度过大等，均对 ELISA 测定结果有干扰作用，可能导致非特异性显色。

试剂相关的非特异性反应

固相载体：固相载体的吸附性能差异、表面不够洁净等可能导致非特异性蛋白吸附，引起非特异性显色。例如，使用质量不佳的酶标板，可能会有较多的非特异性结合。

包被物纯度：包被用抗原或抗体的纯度不够，存在杂质时，这些杂质可能会与样本中的成分发生非特异性结合，增加背景信号，导致非特异性反应。

封闭不充分：如果封闭液选择不当、浓度不够或封闭时间不足，固相载体表面未被封闭的部位会吸附样本中的非特异性蛋白，从而产生非特异性显色。