ELISA检测室内质量控制计划的实际案例？

提供可直接套用的 ELISA 室内质控（IQC）计划与落地案例，覆盖输血筛查、传染病与寄生虫病场景，含指标、规则、判定与处置流程。

通用 IQC 计划框架（落地版）

质控品：自制灰区阳性（Cut Off 附近）、阴性各 1 份；必要时加强阳性。分装冻存，避免反复冻融。

位置与数量：每板至少各 1 孔，复孔 2–4 个；先阴后阳，边角不设质控。

规则与判定

警告：12S（连续 2 点落在均值 ±2SD 同侧）。

失控：13S（1 点 > 均值 ±3SD）或累积 / 趋势异常。

定性专用：设 1Cutoff (+)、1Cutoff (−)，灰区阳 > Cutoff、阴性 < Cutoff；任一违反即判失控。

记录与判定：计算均值、SD、CV；绘制 L-J 图；失控即停发报告，溯源纠正后重测。

仪器校准与维护：移液器称重法校准（±10%）；洗板机残留≤2 μL / 孔；酶标仪波长、通道差、线性与精密度按 SOP 定期核查。

分析前 / 中 / 后质控要点：标本处理、孵育温度时间、封板与避光、TMB 现配现用、板底清洁；异常样本先做确认。

案例 1｜血站抗 HIV/HBsAg/ 抗 HCV ELISA（180 批次）

方法：自制灰区阳 / 阴各 1 份；每板各 1 孔，复孔 2；计算 E-ratio 并绘制 L-J。

判定：12S 警告，13S 失控。

结果：抗 HIV 2 次警告、1 次失控；HBsAg 2 次警告、2 次失控；抗 HCV 2 次警告、2 次失控。经校准仪器、规范试剂与操作后均恢复在控。

结论：每批带 IQC 可及时检出系统 / 随机误差，保障结果可靠。

案例 2｜HBsAg ELISA 定性（160 批次）

方法：灰区阳（约 0.5 ng/mL）与阴性各 1 份；每板各 1 孔。

规则：统计 12S/13S；同时执行 1Cutoff (+)、1Cutoff (−)。

结果：2 月按 12S/13S 无失控；按 1Cutoff (+) 出现 1 次灰区阳 < Cutoff，判为假阴风险，整板重测。3 月阴性孔 1 次 S/CO>1，整板重测。

结论：仅靠统计规则不足以控假阴 / 假阳；加入 1Cutoff (±) 显著提升检出力。

案例 3｜血吸虫抗体磁微粒酶免（186 样本 / 3–40 批）

方法：第 3 批起用 Crubbs 即刻法，≥20 次后转 Z - 分数与 Westgard 多规则（12S/13S/22S/R4S/41S/10X）。

结果：2 个批次 9 份样本因质控失控重测；其余 177 份结果可接受。

结论：Crubbs→Z - 分数 + Westgard 多规则适合新建项目与长期监控，可区分误差类型。

快速落地建议 ✅

起步阶段：每板灰区阳 / 阴各 1 孔（复孔 2），执行 12S/13S+1Cutoff (±)。

建图与判定：累积 20 次定均值 / SD；出现 13S 或 1Cutoff (±) 即停板，溯源校正后重测。

仪器与试剂：每月校准移液器 / 洗板机 / 酶标仪；TMB 现配、避光、20–25℃使用；板底清洁。

趋势与优化：L-J 图 + Youden 图联合判读，识别系统 / 随机误差并持续改进。