一、简要介绍

CDCFDA, SE，是一种有用的荧光示踪剂，能够主动扩散进入细胞，且能共价标记胞内蛋白，从而进行长时间细胞示踪。CDCFDA, SE本身无色且无荧光，一旦被胞内酯酶水解后产生亮绿色荧光。

二、试剂结构

三、物理性质

【英文名称】：5(6)-Carboxy-2',7'-dichlorofluorescein diacetate N-succinimidyl este

【中文名称】：5(6)-羧基-2',7'-二氯二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯

【CAS NO】：147265-60-9

【分子式】：C29H17Cl2NO11

【分子量】：626.35 g/mol

【熔点】：≥220 °C

【状态】：白色固体

【Ex/Em】：504/529nm

【溶解性】：溶于DMSO、DMF

【纯度】：≥95%

【储存条件】：-20℃避光干燥

【生产厂商】：西安强化生物科技

四、CFDA-SE与其他探针的比较

与其他荧光染料相比，CFDA-SE具有较长的标记时间。

在细胞摄取和代谢研究中，CFDA-SE可与其他探针配合使用。

多模态成像技术可弥补CFDA-SE的局限性。

注意事项

荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

五、细胞制备与染色

【注意】：不同的实验所需的染液工作浓度可能不同，需具体实验中调整。此处的实验条件是基于验证过的特定的细胞类型。一般建议短时间的实验（如生存能力分析等），可采用0.5~5 μM 的工作浓度；而长时间染色（3 天以上）或快速分裂期的细胞染色，建议 5~25 μM 的工作浓度。尽可能选择低的染料浓度进行实验。

1. 配制染色储备液，用 DMSO 溶解染料溶解 CDCFDA,SE，使其浓度为 10 mM。

2. 将染色储备液加至无血清培养基中，保持工作液浓度为 0.5~25 μM，孵育温度为 37℃。

3. 对于悬浮细胞，当细胞密度达到所需要求时，即可离心收集细胞，弃上清。用预热的染色液轻轻重悬细胞，在细胞的生长条件下孵育 15~45 分钟后，离心；对于贴壁细胞，达到合适的融合度后，弃去培养基，更换以预热的染色液，在细胞的生长条件下孵育 15~45 分钟。

4. 更换新鲜预热的培养基，37℃孵育 30 分钟，以保证细胞内酯酶水解。

5. 对于悬浮细胞，吸取 5 μl 左右染色后的细胞滴至载玻片上，加盖盖玻片，置于荧光显微镜下观察；对于贴壁细胞，直接观察即可。

6. 如需进行流式分析，可收集细胞至合适的密度，按悬浮细胞孵育标记方法后，上机分析。

六、更多试剂

CFDA，SE(CFSE)细胞增殖示踪荧光探针

Fluorescein diacetate(FDA)二乙酸荧光素

CFDASECell Proliferation andCell TrackingKit

Calcein，AM，Ultra Pure Grade钙黄绿素(绿色)

PSP (Hydrogen Polysulfide Probe)多硫化氢荧光探针

MitoA (Mitochondrial H2S Probe)线粒体硫化氢探针

LysoSensor™MGreen DND-189 溶酶体绿色荧光探针

Sulfidefluor 7 AM (SF7-AM) (H2S Probe)硫化氢荧光探针

JC-10 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit

DL-Propargylglycine (hydrochloride) DL-炔丙基甘氨酸盐酸盐

LysoSensor™Yellow/BlueDND-160(PDMPO)溶酶体黄/蓝色荧光探针

原包装应尽量选择避光，阴暗，干燥的地方进行存放，同时此试剂仅用于科研实验。

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