（CAS：201860-17-5）Mito-Tracker Deep Red FM线粒体深红荧光探针，使用方法和注意事项_产品说明_仪器仪表技术文献

（CAS：201860-17-5）Mito-Tracker Deep Red FM线粒体深红荧光探针，使用方法和注意事项

提供者：西安强化生物科技有限公司发布时间：2025/3/26 11:42:25 阅读次数：68次进入该公司店铺

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一、简要介绍

MitoTracker Deep Red FM是一种远红外荧光染料（吸收/发射波长分别为~644/665 nm），可染色活细胞中的线粒体，用于线粒体定位。该染料在醛固定后可良好保留，甚至是后续的去污剂透化处理后仍可保留。

二、试剂结构

三、物理性质

【英文名称】：Mito-Tracker Deep Red FM

【中文名称】：线粒体深红荧光探针

【CAS NO】：201860-17-5

【分子式】：C34H36Cl2N2

【分子量】：543.58

【状态】：蓝色固体

【Ex/Em】：644⁄665nm

【溶解性】：溶于DMSO

【纯度】：≥95%

【储存条件】：-20℃避光干燥

【生产厂商】：西安强化生物科技

四、使用方法和注意事项

使用方法

1. 储存液的配制

本品是以粉末形式提供，使用前需将本品回温至室温。

之后使用细胞培养级别的无水DMSO将其溶解至终浓度1 mM。

50 µg粉末只需加入92 µL DMSO即可得到1 mM储存液。

可根据单次的使用量将储存液分装后放到-20℃避光，避免反复冻融。

2. 工作液的配制

根据不同的实验目的使用不同的探针浓度，以下的起始操作条件用作参考，可根据细胞类型和其他的相关因素如细胞或组织的透化等进行调整。

用缓冲液或者细胞培养基稀释1 mM储存液至工作液浓度。一般使用浓度为25-500 nM。对于后续需要做固定或透化的样本，工作浓度为100-500 nM，为了降低过度加载导致的潜在伪影，在不影响实验结果的前提下应尽可能低浓度染色。另外，浓度过高也可能对其他细胞结构进行染色。

3. 染色及检测

1）贴壁细胞的染色

培养皿/板内加入培养基覆盖盖玻片进行爬片培养。当细胞长至所需丰度，吸除培养液，加入37℃预热的MitoTracker® Deep Red FM染色工作液。在所使用细胞正常培养条件下孵育15-45 min。染色结束后，使用新鲜培养液或缓冲液替换上述染色液，即可将其置于荧光显微镜下观察或荧光酶标仪下读数。

2）悬浮细胞的染色

离心收集细胞，吸除上清，利用37℃预热的MitoTracker® Deep Red FM染色工作液轻轻重悬细胞。在所使用细胞正常培养条件下孵育15-45 min。染色结束后，离心收集细胞，利用37℃预热的新鲜培养液或缓冲液重悬细胞，被染色的细胞可用流式细胞仪、荧光酶标仪、荧光显微镜进行分析。

如果需要盖玻片上固定化的细胞，那么可在铺片前先用多聚赖氨酸包被载玻片或盖玻片。

4. 固定和透化

1）染色结束后，利用培养液或缓冲液清洗细胞；

2）小心吸走清洗液。换用新鲜配制且预热的含2-4%甲醛的缓冲液或培养液进行细胞固定。

3）清洗细胞：吸除固定液，用缓冲液冲洗细胞数次。

4）细胞透化（可选）：

像ICC等实验需要细胞要做透化，则可将已固定的细胞直接加入含有去污剂如Triton X-100的缓冲液中孵育。透化结束后，用缓冲液清洗细胞即可进行后续ICC实验。经检测，利用含0.2% Triton X-100的PBS孵育内皮细胞10 min可以达到良好的透化效果。

另外，还可利用预冷的丙酮透化5 min，之后用PBS清洗细胞。经验证，即使后继没有进一步的抗体标记，丙酮透化处理也可降低背景信号。

注意事项

Mito-Tracker Deep Red FM可以用于活细胞的线粒体荧光染色，不适合用于固定后细胞或者组织的染色；但在用本品标记线粒体后，后续可以进行固定和通透，并用其它探针进行染色或进行免疫荧光染色，但染色后再固定和通透，荧光强度会有一定程度的下降。而且不同的细胞，固定和通透的影响会有所区别，建议对固定和通透试剂、条件进行一定的测试。

本品包含非常微量的粉末，使用前请先离心数秒钟，使微量粉末充分沉降到管底。

荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

本品对人体有害，操作时请小心，并注意防护以避免直接接触人体或吸入体内。

本产品只供专业人员的科学研究用，不得用于临床，不得用于食品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。