分光光度计是利用分光光度法，通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。不同种类的分光光度计的基本原理相似，都是利用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源。光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，通过测量样品的吸光值，经过计算可以转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
分光光度计的检验小妙招：
1.波长准确度的检验：
分光光度计在使用过程中，由于机械振动、温度变化、灯丝变形、灯座松动或更换灯泡等原因，经常会出现刻度盘上的读数与实际通过溶液的波长不符合的现象，因而导致仪器灵明度降低，影响测定结果的精度，需要进行检验。
检验波长准确度简单的方法是用干涉滤光片或镨钕滤光片测量仪器的吸收峰值，如果测出的值与滤光片标准值之差超出规程规定，则需要进行波长调节。
2.透射比正确度的检验：
用透射比标准值分别为10%、20%、30%左右的光谱中性滤光片，可见光区分别在440、546、635nm波长处，以空气为参比，分别测量各滤光片的透射比，紫外光区用重铬酸钾溶液分别在235、257、313、350nm波长处，以高氯酸溶液为参比，测量其透射比。
3.稳定度的检验：
在零点不受光的条件下，用零点调节器将仪器调至零点，观察3分钟读取透射比的变化，即为零点稳定性。在仪器测量范围两端向中间靠10nm处，调节零点后，盖上样品室盖(打开光门)，使光电管受光，调节透射比为95%（数显仪器调至100%）察3分钟读取透射比的变化，为光电流稳定性。
4.光的检验：
分光光度计棱镜式仪器在420nm处，光栅式仪器在360nm处，紫外分光计在220nm处分别用符合规定的截止滤光片，以空气为参比，测量其透射比值，即为仪器在相应波长下的杂散辐射率。
分光光度计广泛应用于医药卫生、临床检验、生物化学、石油化工、环境保护、质量控制、司法刑侦、检验检疫林业、地质勘探、食品检测等行业，是理化实验室常用的分析仪器之一。
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