在细胞培养实验中，防止支原体污染是一项重要任务，以下是一些避免支原体污染的方法：

实验环境控制

空间消毒：使用支原体清除喷雾（如Mycoplasma-off）对实验室空间进行定期消毒。

设备清洁：定期对生物安全柜或超净工作台进行消毒，并在每次使用后做好清洁工作，避免在内部堆放不必要的物品。

水浴锅和培养箱消毒：在水浴锅和培养箱的水源中加入消毒试剂。

操作规范

手部消毒：操作开始前，使用75%酒精对双手以及可能接触到培养物的袖口、瓶口等部位进行消毒。

器具区分：进行多种细胞培养操作时，所用的移液枪等器具要严格区分，避免交叉污染。

操作细节：在换液或传代操作时，确保注射器和滴管不触及细胞培养瓶瓶口，以防止细菌污染培养液。

培养基和器材管理

保证无菌：确保使用的所有培养基和器材经过辐射处理或其他无菌处理，商业化CD培养基一般也能保证无菌。一旦实验室发现支原体感染，已经开启的培养基不宜继续使用。

细胞来源控制

原始组织或器官：从来源可靠的原始组织或器官制备细胞，以降低污染风险。

种子库管理：从信誉良好的专门机构引进细胞，如ATCC、基础医学细胞中心等，并及早留种冻存，一旦发生污染可重新复苏培养。建立良好的种子库管理规章制度，并定期对实验室中的培养物进行支原体检测。

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