MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，我们不为任何个人用途提供产品和服务。

Torin 1

MCE 国际站：Torin 1

品牌：MedChemExpress (MCE)

CAS：1222998-36-8

纯度：0.9908

货号：HY-13003

存储条件：粉末 -20°C 3 年 4°C 2 年 溶剂中 -80°C 1 年 -20°C 6 个月

运输条件：美国大陆的室温；其他地方可能有所不同。

产品活性：Torin 1 是一种有效的 mTOR 抑制剂，IC50 为 3 nM。Torin 1 抑制 mTORC1/2 复合物，IC50 值在 2 和 10 nM 之间。Torin 1 有效诱导自噬 (autophagy)。

体外：Torin1 (250 nM) 可完全抑制增殖并导致 G1/S 细胞周期停滞，并且在野生型 MEF 中比 50 nM 雷帕霉素更大程度地减小细胞大小[1]。Torin1 在 mTOR 和 PI3Kis 之间的选择性超过 800 倍，并且相对于 DNA-PK 以外的其他 PIKK 家族激酶具有很高的选择性[2]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

体内：Torin1（20 mg/kg，腹腔注射）在U87MG异种移植模型中有效，并对肿瘤和外周组织中的mTOR下游效应物表现出良好的药效学抑制作用[2]。MCE尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

动物实验：对于药效学实验，首先将 torin 1 粉末以 25 mg/mL 的浓度溶解在 100% N-甲基-2-吡咯烷酮中，然后在注射前用无菌 50% PEG400 以 1:4 的比例稀释。六周龄雄性 C57BL/6 小鼠在药物治疗前禁食过夜。通过腹腔注射给小鼠注射载体（10 小时）或 26（20 mg/kg，2、6 或 10 小时），然后在处死前 1 小时重新注射（CO2 窒息）。收集组织并在干冰上冷冻。将冷冻组织在冰上解冻，并在组织裂解缓冲液（50 mM HEPES，pH 7.4，40 mM NaCl，2 mM EDTA，1.5 mM 正钒酸钠，50 mM 氟化钠，10 mM 焦磷酸钠，10 mM β-甘油磷酸钠，0.1% SDS，1.0% 脱氧胆酸钠和 1.0% Triton，补充有蛋白酶抑制剂混合物片剂）中通过超声处理进行裂解。使用 Bradford 测定法测量透明裂解物的浓度，然后通过蛋白质含量对样品进行标准化，并通过 SDS-PAGE 和免疫印迹进行分析。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

细胞实验：在第 0 天，将 96 孔板接种到每孔 500 个细胞中并培养过夜。在第 1 天，用适当的化合物处理细胞，然后在第 3-5 天进行分析。为了进行分析，将板在室温下孵育 60 分钟；向每个孔中添加 50 μL CellTiter-Glo 试剂，然后将板放在定轨振荡器上混合 12 分钟。在标准板光度计上量化发光。MCE 尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

激酶实验：为了产生可溶性 mTORC1，使用水泡性口炎病毒 G 假型 MSCV 逆转录病毒生成稳定表达 N 端 FLAG 标记 Raptor 的 HEK-293T 细胞系。对于 mTORC2，生成稳定表达 N 端 FLAG 标记 Protor-1 的 HeLa 细胞。两种复合物均通过在 50 mM HEPES、pH 7.4、10 mM 焦磷酸钠、10 mM β-甘油磷酸钠、100 mM NaCl、2 mM EDTA、0.3% CHAPS 中裂解细胞来纯化。将细胞在 4°C 下裂解 30 分钟，并通过微量离心（13,000 rpm）10 分钟去除不溶性部分。将上清液与 FLAG-M2 单克隆抗体-琼脂糖一起孵育 1 小时，然后用裂解缓冲液洗涤三次，用含有最终浓度为 0.5 mol/L NaCl 的裂解缓冲液洗涤一次。用 50 mM HEPES、pH 7.4、100 mM NaCl 中的 100 μg/mL 3× FLAG 肽洗脱纯化的 mTORC1。洗脱液可以分装并储存在 -80°C 下。激酶测定在 30°C 下进行 20 分钟，最终体积为 20 μL，由激酶缓冲液（25 mM HEPES，pH 7.4、50 mM KCl、10 mM MgCl2、500 μM ATP）和 150 ng 无活性 S6K1 或 Akt1 作为底物组成。通过添加 80 μL 样品缓冲液并煮沸 5 分钟来停止反应。随后，样本将通过 SDS-PAGE 和免疫印迹法进行分析。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

IC50 & Target：mTOR 3 nM (IC50) mTORC1 2-10 nM (IC50) mTORC2 2-10 nM (IC50) ATM 0.6 μM (IC50) DNA-PK 1 μM (IC50) PI3K-α 1.8 μM (IC50) hVps34 3 μM (IC50) Autophagy

热销产品：Benzetimide (hydrochloride) | Ranirestat | CGP77675 | 9-Phenanthrol | DBCO-PEG4-triethoxysilane | Roxithromycin-d7 | Physostigmine (hemisulfate) | Sutimlimab | Tusamitamab | Cobimetinib (R-enantiomer)

Trending products：Recombinant Proteins | Bioactive Screening Libraries | Natural Products | Fluorescent Dye | PROTAC | Isotope-Labeled Compounds | Oligonucleotides

参考文献：

[1]. Thoreen CC, et al, An ATP-competitive mammalian target of rapamycin inhibitor reveals rapamycin-resistant functions of mTORC1. J Biol Chem, 2009, 284(12), 8023-8032.[2]. Liu Q, et al. Discovery of 1-(4-(4-propionylpiperazin-1-yl)-3-(trifluoromethyl)phenyl)-9-(quinolin-3-yl)benzo[h][1,6]naphthyridin-2(1H)-one as a highly potent, selective mammalian target of rapamycin (mTOR) inhibitor for the treatment of cancer. J Med Chem. 2010 Oct 14;53(19):7146-55.[3]. Bi C, et al. Inhibition of 4EBP phosphorylation mediates the cytotoxic effect of mechanistic target of rapamycin kinase inhibitors in aggressive B-cell lymphomas. Haematologica. 2017 Apr;102(4):755-764.[4]. Brandt M, et al. mTORC1 Inactivation Promotes Colitis-Induced Colorectal Cancer but Protects from APC Loss-Dependent Tumorigenesis. Cell Metab. 2018 Jan 9;27(1):118-135.e8.