HSF1A

MCE 国际站：HSF1A

CAS：1196723-93-9

品牌：MedChemExpress (MCE)

存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.

生物活性：HSF1A 是热休克转录因子 1 (HSF1)^[1] 的细胞渗透性激活剂。 HSF1A 还充当 TRiC/CCT 的特异性抑制剂。伴侣蛋白 TCP-1 环复合物 (TRiC)/含有 TCP-1 的伴侣蛋白 (CCT) 在毒素易位和/或重折叠中起着关键作用^[4]。 IC50 和目标：HSF1^[1]体外： HSF1A 保护细胞免受应激诱导的细胞凋亡，结合 TRiC 亚基并抑制 TRiC 活性而不受干扰ATP水解。 TRiC 复合物的遗传失活或耗尽导致人类 HSF1 激活，HSF1A 在体外抑制纯化的 TRiC 和 HSF1 之间的直接相互作用。此外，使用与 HSF1A 偶联的 FITC 进行的荧光各向异性实验表明，HSF1A-FITC 与 TRiC 的纯化 Tcp1 亚基结合，亲和力约为 600 nM。这通过将纯化的 Tcp1 滴定到含有 500 nM 生物素或 HSF1A-生物素的结合反应中进行定性验证^[1]。通过计算含有聚集体的细胞数量作为细胞总数的函数进行量化表明，在 HSF1A 浓度低至 2 μM 时，观察到含有聚集体的细胞数量减少。含有聚集体的细胞比例继续以剂量依赖性方式减少，因此用 12 μM HSF1A 预处理会导致约 20% 的细胞显示出荧光显微镜可见的聚集体^[2]。 体内HSF1A 增强 HSF1 活性，稳定 HSF1 表达并最大限度地减少阿霉素 (DOX) 诱导的心脏损伤。 WKY 大鼠接受 DOX（累积剂量：30?mg/kgw）和 DOX 联合 HSF1A（100?mg/kgw/天）的攻击。补充 HSF1A 可显着提高心脏功能，使其恢复到对照组的水平。在神经退行性疾病模型中，HSF1A 已被证明可以刺激人类 HSF1 核易位、提高蛋白伴侣表达并改善蛋白错误折叠和细胞死亡。超声心动图结果表明，HSF1A 还可以减轻 DOX 引起的心功能衰竭^[3]。

体外：HSF1A 保护细胞免受应激诱导的细胞凋亡，结合 TRiC 亚基并抑制 TRiC 活性而不扰动 ATP 水解。 TRiC 复合物的遗传失活或耗尽导致人类 HSF1 激活，HSF1A 在体外抑制纯化的 TRiC 和 HSF1 之间的直接相互作用。此外，使用与 HSF1A 偶联的 FITC 进行的荧光各向异性实验表明，HSF1A-FITC 与 TRiC 的纯化 Tcp1 亚基结合，亲和力约为 600 nM。这通过将纯化的 Tcp1 滴定到含有 500 nM 生物素或 HSF1A-生物素的结合反应中进行定性验证^[1]。通过计算含有聚集体的细胞数量作为细胞总数的函数进行量化表明，在 HSF1A 浓度低至 2 M 时，观察到含有聚集体的细胞数量减少。含有聚集体的细胞比例继续以剂量依赖性方式减少，因此用 12 M HSF1A 预处理会导致约 20% 的细胞显示出荧光显微镜可见的聚集体^[2]。

体内：HSF1A 增强 HSF1 活性，稳定 HSF1 表达并最大限度地减少阿霉素 (DOX) 诱导的心脏损伤。 WKY 大鼠接受 DOX（累积剂量：30 mg/kgw）和 DOX 联合 HSF1A（100 mg/kgw/天）的攻击。补充 HSF1A 可显着提高心脏功能，使其恢复到对照组的水平。在神经退行性疾病模型中，HSF1A 已被证明可以刺激人类 HSF1 核易位、提高蛋白伴侣表达并改善蛋白错误折叠和细胞死亡。超声心动图结果表明，HSF1A 还可以减轻 DOX 引起的心功能衰竭^[3]。

激酶试验：使用补充有 1% Trition-X100 和蛋白酶的生物素结合缓冲液（20 mM HEPES、5 mM MgCl2、1 mM EDTA、100 mM KCl、0.03% NP-40）从哺乳动物、酵母和大肠杆菌培养物中产生蛋白质提取物抑制剂。将大约 0.5 mg 蛋白质提取物与 100 μM HSF1A-生物素在 4°C 下孵育 4 小时，并用 NeutrAvidin 琼脂糖树脂捕获 HSF1A-生物素相关蛋白质。在生物素结合缓冲液中洗涤后，使用 50 μL 生物素洗脱缓冲液（100 mM Tris、150 mM NaCl、0.1 mM EDTA、2 mM D-生物素）洗脱蛋白质，在 4-20% SDS-PAGE 上解析并进行免疫印迹。对于纯化的 TRiC 和 Hsp70 分析，将 5 nM 蛋白质在生物素结合缓冲液+0.5% Triton X-100 中与 100 μM 生物素或 100 μM HSF1A-生物素在 4°C 下孵育 4 小时，并用 NeutrAvidin 树脂捕获。对于 NiNTA 纯化的酵母 Tcp1，将不同浓度的 Tcp1 0.5 μM、1 mM、2 mM、3 mM 和 4 mM 在 25 mM Hepes pH 7.5、150 mM NaCl 中与 0.5 μM 生物素或 HSF1A-生物素在 4° 下孵育 4 小时C 并用 NeutrAvidin 树脂捕获[1]。

细胞试验：将 PC12 细胞接种到 96 孔板（5×104 个细胞/孔）中，用浓度不断增加的 HSF1A（2、4、8 和 12 μM）处理 15 小时，此时通过在培养皿中孵育来刺激 httQ74-GFP 表达。 1 g/mL 多西环素存在 5 d。通过 XTT 活力测定评估细胞活力[2]。

动物体内实验:大鼠[3] 使用十周大的Wistar京都大鼠(WKY)。将大鼠饲养在恒温 (22°C) 下，光照/黑暗周期为 12 小时，并提供食物和自来水。将动物分为三组：WKY大鼠（对照组）、DOX大鼠和用HSF1A处理的DOX大鼠。每组包含五只动物。 DOX组连续6周腹腔注射DOX（5 mg/kg），以达到30 mg/kg的累积剂量，该剂量已被充分证明可实现心脏毒性。小分子HSF1激活剂HSF1A（100毫克/公斤/天）腹膜内注射。

热销产品：Texasin | bPiDI | Phenformin (hydrochloride) | Ginsenoside Rb2 | Corosolic acid | Anamorelin | Treprostinil | [8]-Shogaol | Methoxsalen | TCS 401

研究领域：Cell Cycle/DNA Damage | Metabolic Enzyme/Protease

作用靶点：HSP

热门产品线：重组蛋白 | 化合物库 | 天然产物 | 荧光染料 | PROTAC | 同位素标记物 | 寡核苷酸

Trending products：Recombinant Proteins | Bioactive Screening Libraries | Natural Products | Fluorescent Dye | PROTAC | Isotope-Labeled Compounds | Oligonucleotides

参考文献：

[1]. Marcus Steinemann, et al. The chaperonin TRiC/CCT is essential for the action of bacterial glycosylating protein toxins like Clostridium difficile toxins A ａnd B. Proc Natl Acad Sci U S A. 2018 Sep 18;115(38):9580-9585.[2]. Neef DW, et al. A direct regulatory interaction between chaperonin TRiC ａnd stress-responsive transcription factor HSF1. Cell Rep. 2014 Nov 6;9(3):955-66.[3]. Neef DW, et al. Modulation of heat shock transcription factor 1 as a therapeutic target for small molecule intervention in neurodegenerative disease. PLoS Biol. 2010 Jan 19;8(1):e1000291.[4]. Huang CY, et al. Doxorubicin attenuates CHIP-guarded HSF1 nuclear translocation ａnd protein stability to trigger IGF-IIR-dependent cardiomyocyte death. Cell Death Dis. 2016 Nov 3;7(11):e2455.