实验方法：根据《蜂胶中总黄酮含量的测定方法分光光度比色法》（GB/T 20574—2006），利用分光光度比色法对蜂胶软胶囊中的总黄酮进行定量分析。

试剂

芦丁标准品（含量95.5%，上海安谱璀世标准技术服务有限公司，批号2251131）；

无水乙醇、硝酸铝、95% 乙醇、醋酸钾（分析纯，南京化学试剂有限公司）

仪器

UV-1800 紫外可见分光光度计（上海美析仪器有限公司）；

超声波清洗仪；

高速台式离心机；

BT25S 十万分之一电子天平、BSA224S-CW 电子天平。

试样的制备

称取蜂胶软胶囊内容物0.5 g（精却至1 mg）于烧杯中，加入95%乙醇约30 mL，室温下超声提取20 min，将溶液转移至50mL的容量瓶中，加入95%乙醇至刻度线，混合均匀后进行过滤，弃去初滤液，收集滤液待测。准确吸取1.0mL待测溶液于50mL容量瓶中，分别加入1.0 mL硝酸铝溶液和1.0mL醋酸钾溶液，加95%乙醇至刻度，摇匀，静置10 min，3 000 r·min-1离心3min，取上清液待测。空白实验精密吸取1.0 mL待测溶液于50 mL容量瓶中，加95%乙醇至刻度，摇匀。用1 cm比色皿，在415 nm以空白试液作参比，测定样品吸光度。

标准溶液制备

称取10.50mg芦丁标准品（含量95.5%）于50 mL容量瓶中，用无水乙醇溶解，并定容至刻度，摇匀，溶液浓度为0.2 g·L-1 。吸取标准溶液0mL、1.00 mL、 2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL和6.00 mL（相当于芦丁含量 0 mg、0.2 mg、0.4 mg、0.6 mg、0.8 mg、

1.0 mg 和1.2 mg），分别置于50 mL容量瓶中，向容量瓶中加入1.0mL硝酸铝溶液和1.0mL醋酸钾溶液，用95%乙醇定容至刻度，摇匀，静置10 min后测定。

结果计算

总黄酮计算公式为

式中：X 为黄酮类化合物的总含量，%；

m1 为由标准曲线上查出测定液中芦丁质量，mg；

m 为样品的质量，g；

d 为稀释比例。