人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

96T

使用目的：

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)

表达。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人1,3βD 葡葡糖苷酶(1,3βDGlu)表达。用纯化的

人1,3βD葡葡糖苷酶(1,3βDGlu)抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中1,3-βD

葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的

1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)抗体结合，形成抗体抗原酶标抗体复合物，经过洗

涤后加底物TMB显色。TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终

的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），与CUTOFF值相比较，从而判定

标本中人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)的存在与否。

试剂盒组成

130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶

2酶标试剂6ml×1瓶8阳性对照0.5ml×1瓶

3酶标包被板12孔×8条9阴性对照0.5ml×1瓶

4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份

5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张

6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能

马上进行试验，可将标本放于20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1

孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）

2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50l。然后在待测样品孔先

加样品稀释液40l，然后再加待测样品10l。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不

触及孔壁，轻轻晃动混匀，

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30后弃去，如此

重复5次，拍干。