人p38丝裂素活化蛋白激酶（p38MAPK）试剂盒组成

　　1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶

　　2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品（96U/L） 0.5ml×1瓶

　　3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶

　　4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份

　　5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张

　　6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个

　　标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

　　试剂盒组成及试剂配制：

　　1.酶联板（Assayplate）：一块（96孔）。

　　2.标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

　　3.样品稀释液（SampleDiluent）：1×20ml/瓶。

　　4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibodyDiluent）：1×10ml/瓶。

　　5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidinDiluent）：1×10ml/瓶。

　　6.生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

　　7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

　　8.底物溶液（TMBSubstrate）：1×10ml/瓶。

　　9.浓洗涤液（WashBuffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

　　10.终止液（StopSolution）：1×10ml/瓶（2NH2SO4）。

　　计算

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

　　生物素标记抗体的稀释原则：

　　临用前以生物素标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。