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分析:小鼠腺甘酸激酶1(AK1) ELISA 试剂盒 @2024已更新推荐

提供者:上海笃玛生物科技有限公司   发布时间:2024/1/12 13:25:40  阅读次数:2637次  进入该公司店铺

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小鼠腺甘酸激酶1(AK1) ELISA 试剂盒


实验原理

1. 抗体或抗原的吸附:将待测抗原或抗体吸附到固相载体上,常用的载体有微孔板、玻璃纤维、聚苯乙烯等。这些载体表面具有特殊的化学基团,能够与待测抗原或抗体特异性结合。
2. 酶标记的抗体或抗原的结合:将酶标记的抗体或抗原与待测抗原或抗体结合,形成酶标记的抗原-抗体复合物。酶标记的抗体或抗原具有高度的特异性和亲和力,能够与待测抗原或抗体形成稳定的复合物。
3. 底物显色反应:当酶标记的抗原-抗体复合物与底物溶液接触时,酶能够催化底物分解,产生颜色变化。通过测量颜色的变化程度,可以判断待测抗原或抗体的浓度。



试剂盒性能

检测范围:5 pg/mL – 160 pg/mL。
灵敏度:检测浓度小于1.0 pg/mL。
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。




试剂盒组成

名称

96 孔配置

48 孔配置

备注

微孔酶标板

12 孔×8 条

12 孔×4 条

无

标准品

0.5mL

0.5mL

按说明书进行稀释

标准品稀释液

6mL

3mL

按说明书进行稀释

样本稀释液

6mL

3mL

按说明书进行稀释

检测抗体

6mL

3mL

无

20×洗涤缓冲液

20mL

20mL

按说明书进行稀释

底物 A

6mL

3mL

无

底物 B

6mL

3mL

无

终止液

6mL

3mL

无

封板膜

2 张

2 张

无

说明书

1 份

1 份

无

自封袋

1 个

1 个

无




实验步骤

1. 准备试剂盒:将试剂盒从冰箱中取出,室温放置30分钟以上,使试剂盒恢复至室温。
2. 加样:分别向各孔中加入标准品、待测样本和空白孔,每孔加入50μl。
3. 孵育:用封板胶纸封住反应孔,轻轻振荡混匀,37℃孵育1小时。
4. 洗涤:甩去孔内液体,用洗涤液充分洗涤4-5次,每次30。
5. 加酶标二抗:每孔加入50μl酶标二抗溶液,轻轻振荡混匀,37℃孵育30分钟。
6. 洗涤:甩去孔内液体,用洗涤液充分洗涤4-5次,每次30。
7. 加底物:每孔加入50μl底物溶液,轻轻振荡混匀,37℃孵育15-20分钟。
8. 终止反应:每孔加入50μl终止液,轻轻振荡混匀。
9. 读数:用酶标仪在450nm波长处读取各孔的光密度值。



注意事项

1. 试剂盒保存于2-8℃,切勿反复冻融或长时间保存于室温。
2. 实验确保所有试剂均已恢复至室温。
3. 加样时注意避免产生气泡。
4. 洗涤时要充分洗涤,避免残留物影响实验结果。
5. 底物溶液应避光保存,避免长时间暴露于空气中。
6. 酶标仪应使用450nm波长进行读数,其他波长可能导致误差。
7. 本试剂盒仅用于科研实验和诊断参考,不适用于临床诊断和治疗。




结果分析

根据试剂盒提供的标准品浓度及对应的OD值,利用标准品绘制的标准曲线,计算待测样品的浓度。一般采用拟合曲线法或直线回归法进行数据处理,通过计算得到待测样品的浓度。




化学实验室守则:

1. 实验室要保持安静,严禁大声喧哗、吵闹。
2. 在实验,要预先作好实验准备,进入实验室时,要有秩序,按规定的座位就座。
3. 实验,必须了解清楚实验内容、目的、要求和实验步骤。
4. 实验开始时,应先查点仪器、产品是否齐全,不得随意调换,如发现问题,及时报告。
5. 实验必须按步骤进行,并仔细观察,做好记录,实验后后及时写好实验报告。
6. 实验时,要爱护仪器,节省产品,由于违反操作规程而损坏丢失的仪器,必须赔偿。
7. 实验结束,要将仪器整理或清洗,保持桌面,室内的整洁后才能离开。
8. 本守则在实验都应需知。



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