为促进国内相关领域的研究进展,上海闪晶分子生物科技有限公司从2008年开始,对国内实验室开展重组腺病毒/慢病毒构建,包装及扩增服务,可以由客户提供自己的基因,完成腺病毒/慢病毒构建,鉴定,包装的服务.我们的宗旨是:“专业公司,打造专业服务”

一.技术路线:

（一） A. 腺病毒载体构建:

本系统是以Ad5血清型E1/E3缺陷型腺病毒DNA为架,在克隆,包装,扩增等各部条件做了改进和优化,达到了克隆阳性率更高,质量更可靠,包装稳定,出毒迅速,滴度高等效果.在此基础上,还拓展了更广泛的应用,可以提供各种带报告基因的,带不同标签的腺病毒构建和包装服务.所包装的腺病毒已成功应用于信号转导,基因转位,Co-IP,干细胞研究等科研实验.并且可以完成较高难度的克隆构建,包括具有细胞毒性作用基因的腺病毒构建,在短时间内完成从原始质粒到病毒DAN的构建工作.

B.慢病毒载体构建

慢病毒（Lent Virus）载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体,该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,达到持久性表达的效果.可有效地感染神经元肝细胞,心肌细胞,肿瘤细胞,内皮细胞,干细胞等多种类型的细胞,效果非常理想,因此具有广阔的应用前景.

（二）病毒包装、扩增:

1.） 将鉴定正确的基因克隆到慢病毒载体,与辅助载体一起转染293T细胞进行包装;

2.） 将包装好的病毒超速离心收集;

3.）将浓缩病毒进行滴定,滴定结果单位为PFU/ml（一般为5*108PFU/ml以上,体积为500µl以上,根据客户需要,不同量有价格差异）

二、质量控制与鉴定:

1.）测序鉴定

2.）根据特定引物作RT-PCR鉴定

3.）蛋白表达鉴定（根据客户要求并由客户提供高特异性抗体）