CloneSelect Single-Cell Printer f. sight 荧光辅助分选加快重组 CHO 细胞的克隆选择_分析方法_仪器仪表技术文献

CloneSelect Single-Cell Printer f. sight 荧光辅助分选加快重组 CHO 细胞的克隆选择

提供者：美谷分子仪器（上海）有限公司发布时间：2021/5/20 13:21:49 阅读次数：2929次进入该公司店铺

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生物治疗药物和治疗性蛋白质的市场在 2018 年价值 931.4 亿美元，预计到 20221 年底将增长近倍。然而，对高产哺乳动物 CHO 细胞株的选择仍然代表着生物制药生产过程开发中的主要瓶颈 2。因此，开发新的高通量方法以有效和具有成本效益的方式选择高表达的 CHO 细胞株变得越来越重要。使用多轮甲氨蝶呤 (MTX) 或蛋氨酸亚砜亚胺 (MSX) 诱导的基因扩增和有限稀释的传统方法效率低下，费时，费力，并且并不总是能产生具有所需生产水平的克隆。FACS 的筛选方法可以提高效率和通量，但需要大量的资金投入，密集的操作员培训和门的人员。 FACS 工作流由于与细胞直接接触的非次性组件而容易受到交叉污染。此外，对于对流体压力敏感的细胞株，细胞可能显示出较低的生存力，并且在 FACs 筛选后不能很好地恢复。

在本研究中，使用 CloneSelect® Single-Cell Printer f. sight ™和带有荧光报告基因的 CHO 细胞系，用于快速，早期鉴定产生高水平治疗性蛋白质——重组人白介素 15 (tr-hIL15) 的克隆。编码 tr-hIL15 和报告蛋白的基因通过内部核糖体进入位点 (IRES) 连接，因此它们可以在同 mRNA 中转录，但可以独立翻译。由于它们来自相同的 mRNA 分子，因此报告蛋白的表达水平可用于预测每个克隆的治疗性蛋白的相对表达水平。