图1. 近红外一区多模态光声显微成像系统（ANI-OPO）结构示意图

针对当研究中缺乏同时活体高分辨成像全脑皮层区域胶质淋巴/脑血管结构的成像技术，华南师范大学杨思华团队展开了新的探索，使用了广东光声科技有限公司联合建立的双波长交替激发的近红外一区多模态光声显微成像系统（ANI-OPO），并结合一种ICG-OVA大分子光声示踪剂，通过532 nm波长成像脑血管结构，通过780 nm波长示踪胶质淋巴通路，从而同时实现脑血管和胶质淋巴系统的活体共定位成像。

图2. ICG示踪剂注射后半小时光声成像

ICG示踪剂通过注射后半小时对小鼠进行光声成像（图2）就可以分别获取到脑皮层的脑血管结构和胶质淋巴通路的分布情况，和双光子成像相比光声成像不需要处理颅骨，具有更大的成像视野，可以一次性获取全脑皮层的信息。选取三个不同的区域进行放大，可以看到胶质淋巴通路和血管的空间位置关系，胶质淋巴通路主要沿着脑动脉血管进入脑实质中。

图3. 上矢状窦，横窦的交叉，后中动脉光声成像结果

进一步地，通过连续成像监测了上矢状窦和横窦的交叉位置，以及后中动脉两个位置的脑脊液的引流情况（图3），成像结果可以看到当示踪剂注射到脑脊液大概1小时的时候能够充分的随着脑脊液的循环到达脑组织中的各个位置，随着脑脊液的进一步循环示踪剂被排出至颈部淋巴结，因此光声信号会出现下降的趋势，而脑血管的状态在没有外界刺激的情况下基本是保持稳定的。
总结：在本研究中介绍了一种适用于共定位脑血管和淋巴系统的光声显微成像方法与系统，解决了现有临床成像技术在研究胶质淋巴系统中存在空间分辨率和成像特异性方面的技术难题。该方法允许跨脑区域动态追踪脑脊液清除大脑代谢废物的路径和功能，有助于为解决当关于大脑淋巴系统的争议问题提供有价值的活体成像信息。

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