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人切除修复交叉互补基因1 ERCC1ELISA试剂盒做标准曲线样品检测时注意事项

提供者:上海谷研实业有限公司   发布时间:2021/4/26 13:14:43  阅读次数:3512次  进入该公司店铺

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人切除修复交叉互补基因1 ERCC1elisa试剂盒做标准曲线样品检测时有几个问题需要注意:
1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的件事,否则后面的实验结果无从谈起。
2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度zui陡段,即曲线几乎成直线的范围内。
3、采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。
4、检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确性。
5、标准曲线的样品数般为7个点,但至少要保证有5个点。
6、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但般来说,相关系数R至少要大于0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999。
样品活化方法
生物样品中的通常以无活性的形式存在,在检测指标活性必须进行活化处理。
活化方法如下:
血清、血浆: 280 μL标准品&样品稀释液中加入40 μL样品,混匀,加入40 μL活化试剂1,室温孵育10分钟。再加入40 μL活化试剂2,混匀后立即检测。
注意:样品被稀释了10倍!
细胞培养上清:20 μL标准品&样品稀释液中加入100 μL样品,混匀,加入40 μL活化试剂1,室温孵育10分钟。再加入40 μL活化试剂2,混匀后立即检测。
注意:样品被稀释了2倍!
组织匀浆:1960 μL标准品&样品稀释液中加入40 μL样品,混匀后检测。
注意:样品被稀释了50倍!
试验所需自备物品。
1. 酶标仪(450nm波长滤光片)。
2. 高精度移液器,EP管及次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL。
3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水。
4. 吸水纸。
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