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可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒操作步骤

提供者:上海仁捷生物科技有限公司   发布时间:2021/4/20 20:30:23  阅读次数:2998次  进入该公司店铺

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可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒操作步骤
测定意义:SSS(EC 2.4.1.21)通常以游离态存在于质体基质中,催化淀粉链延长,主要负责支链淀粉的合成。

测定原理:SSS 催化ADPG 与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP,在反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH,NADPH 生成量与步反应中ADP 生成量呈正比,340nm 下测定NADPH 增加量即可计算SSS 活性。

需自备的的仪器和用品:紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、移液器、1 mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。


可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒操作步骤
实验实例:

1、 取约 0.1g 肝脏加入 1mL 提取液,冰浴中匀浆。10000g,4℃离心 10 分钟,取上清置冰上待测。之后按照测定 步骤操作,测得计算ΔA=A2-A1=0.394-0.211=0.183,按样本质量计算酶活得: SSS 活性(U/g 质量)=43.2×ΔA÷W=79.056 U/g 质量。
2、 取约 0.1g 冬青加入 1mL 提取液,冰浴中匀浆。10000g,4℃离心 10 分钟,取上清置冰上待测。之后按照测定 步骤操作,测得计算ΔA=A2-A1=1.31-1.303=0.007,按样本质量计算酶活得: SSS 活性(U/g 质量)=43.2×ΔA÷W=3.024 U/g 质量。
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