硫氧还蛋白氧化还原酶（TrxR）测试盒_分析方法_仪器仪表技术文献

硫氧还蛋白氧化还原酶（TrxR）测试盒

提供者：上海仁捷生物科技有限公司发布时间：2021/3/24 19:39:16 阅读次数：2970次进入该公司店铺

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测定意义：TrxR是种NADPH依赖的包含FAD结构域的二聚体硒酶，属于吡啶核苷酸-二硫化物氧化还原酶家族成员，与硫氧还蛋白以及NADPH共同构成了硫氧还蛋白系统。TrxR与GR活性类似，催化GSSG还原生成GSH，是谷胱甘肽氧化还原循环关键酶之。

测定原理：TrxR催化NADPH还原DTNB生成TNB和NADP+，TNB在412 nm有特征吸收峰，通过测定412nm波长处TNB的增加速率，即可计算TrxR活性。

需要的仪器，耗材:低温离心机、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水。

注意：实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

样本处理

1、组织：按照组织质量（g）：试剂体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂）进行冰浴匀浆。10000rpm，4℃离心 10min，取上清置冰上待检测。 2、细菌、细胞：按照细胞数量（10 4 个）：试剂体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 试剂），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3s，间隔 7s，总时间 3min），然后 10000rpm，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。

注：测定将上清液与试剂四以50：1的体积比混匀（即取100μL上清液加入2μL试剂四混合）37℃水浴30min 后至冰上。