elisa试剂盒是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。虽然ELISA试剂盒的操作步骤看似简单，但没做到位的话就会影响实验的效果。所以elisa试剂盒实验时至关重要的步骤有：
一、重要的洗涤：
不充分的洗涤会导致差异和高背景，从而带来不理想的实验结果。如果未结合的材料残留在微孔板中，那么它会增加背景噪音。有必要的话，可增加洗涤液中的盐浓度，这会阻止非特异结合反应。如果背景过高，怀疑洗涤不够时，可以尝试增加洗涤次数。
二、关键的封闭：
封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。如果背景过高，怀疑封闭不充分，那么可以尝试使用更高浓度的封闭液，或适当延长封闭时间。目前主要有两种类型的封闭液：蛋白和非离子型去污剂。使用的类型须取决于多个因素，包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合，但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。
三、抗体浓度须优化：
如果试剂稍有不同，则可能需要优化抗体的量。非特异的抗体结合会增加背景。为了防止这一点，切勿使用过多的一抗或二抗。
四、检测试剂要适量：
切勿使用过多的检测试剂。如果浓度过高，或者未正确稀释，则会导致高背景。也不要显色过度，如有必要，优化一下何时应加入终止液。只有确保每一步操作都做到位，才会呈现完美的实验结果。所以ELISA实验的每一步都很重要，不可以掉以轻心。
上海劲马ELISA检测试剂盒是酶联免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。
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