细胞分裂分指数_分析方法_仪器仪表技术文献

提供者：上海雅吉生物科技有限公司发布时间：2020/9/8 9:50:47 阅读次数：3655次进入该公司店铺

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杨*

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实验方法原理

细胞分指数是指被测细胞群每1000 个细胞中的分裂细胞数（分裂细胞/1000），用以表示细胞增殖旺盛程度。因此在检测中需观察和记录群体中1000 个细胞中的细胞分裂相数。细胞分裂是细胞增殖的方式，能比较确切地反映细胞增殖度。

细胞分裂在培养的活细胞中也可直接观察到，因细胞分裂是动态变化过程，故分析细胞分裂指数需用固定标本。

实验材料

细胞

仪器、耗材

盖片显微镜

实验步骤

计算细胞分裂指数需用向培养瓶中加盖片培养法；每日从瓶中抽出盖片进行固定、染色、制成永久标本，镜下观察分裂相并计数。

注意事项

在计算分裂相时，要注意的是

1. 掌握好确定分裂相标准，其中主要是确定好划分间期和前期、末期和间期等的界限，当两人以上进行观察时更须如此，并始终一致，否则会发生人为误差；

2. 细胞在盖片上的密度常不均匀，细胞高密区与细胞稀疏区细胞分裂相多少可能不同，观察时要选择密度近似区，减少误差；

3. 待取得逐日分裂相数值后，也可绘成细胞分裂指数曲线。

注意，细胞分裂指数曲线与生长曲线趋势基本一致，但不完全相同，如当细胞增长达饮饱合密度并进入停止期后，细胞数值很大，而分裂相可完全消失。

实验方法原理	近年流式光度仪的发展已成为检测细胞增殖周期主要手段，可进行多项柱测，如细胞周期时相、DNA 合成强度、持续时间等，效果极好，已取代了应用同位素等繁琐方法。培养细胞是非常适用于做流式细胞仪检测的对象，程序简单、怏速、效果准确。
实验材料	细胞
仪器、耗材	流式仪
实验步骤	1. 细胞 80 %接近合细胞； 2. 悬液制备用消化法制备成单细胞悬液（细胞数量不少于106）；悬液制备中要仔细，避免产生细胞碎片； 3. 检测进行流式仪检测。流式细胞仪除能检测细胞周期时相变化和反应DNA 合成情况外，也可借以了解染色体倍性；另外尚可结合荧光免疫法对细胞膜进行分析等。