外源因子主要包括微生物、内毒素和病毒抗体等。

01、微生物

1. 细菌和真菌

其中细菌又分为需氧菌和厌氧菌。

这两种微生物的检查又称为“无菌检查”。现多采用培养法。我国药典通则1101和美国药典USP〈71〉有关于无菌检查方法的说明。

牛血清在生产过程中，经0.22mm孔径的滤膜过滤，可完全祛除细菌和真菌，因其大小＞1mm。

2. 支原体

支原体大小介于0.1mm~0.3mm

牛血清在生产过程中，经0.1mm孔径的滤膜三次过滤，可完全祛除支原体。

支原体检查也采用培养法，可参看我国药典通则3301和美国药典USP〈63〉

3. 病毒

病毒检查包括细胞培养法及荧光抗体检测。细胞培养法包括细胞病变效应和血吸附检查。检测多为导致牛常见传染病的病毒，如牛副流感病毒3 型（PI3)、牛腺病毒（BAV-3 ) 、牛细小病毒（BPV ) 以及牛病毒性腹泻病毒（BVD)等。其中，BVD以其发病率高，亚型不具有细胞病变效应而尤其受到重视。

02、内毒素

内毒素是革兰氏阴性菌的细胞壁成分，主要为脂多糖。内毒素对细胞产生刺激，直接导致细胞凋亡，因此内毒素被用来进行血清评级。特级胎牛血清内毒素要求≤10EU/ml。但内毒素浓度越低越好，尤其是对于一些“娇气”的细胞。

内毒素的检测是采用鲎试剂法。

03、病毒抗体

动物感染病毒后，会刺激机体产生抗体。感染治愈后，抗体会长期存在。病毒抗体会影响疫苗细胞苗的毒价。如猪瘟细胞苗的生产，就不能用含BVD抗体的牛血清，因该抗体与猪瘟病毒抗原之间会发生特异性交叉反应。2020版中国药典也规定用于乙脑疫苗生产的新生牛血清，应为乙脑抗体阴性。