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腺病毒型PCR试刘盒常见问题与解决方法

提供者:上海谷研实业有限公司   发布时间:2020/5/21 14:01:14  阅读次数:3534次  进入该公司店铺

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PCR完成后,建议将反应液于1000× g (大约4000 rpm) 离心1~3 min以沉淀血细胞碎片,之后取上清进行下游分析。该步骤可有效去除多种血液组分。当使用高浓度血液模板时此步尤为重要,因为经过PCR循环,反应管中会存在大量的血细胞碎片。这些碎片会干扰下游的检测,如琼脂糖电泳检测。注意:由于血液本身的原因,PCR 结束后在 PCR 管的底部会出现透明凝胶状物质,此为正常现象。
腺病毒型PCR试剂盒常见问题与解决方法

在PCR结果分析时,不管是阳性结果或阴性结果,如果没有对照反应,都不能确定结果是否可靠。为了便于后续实验结果的分析,建议在进行PCR时,设置阳性和阴性PCR对照反应以便于排除假阳性或假阴性的干扰。

注意事项
1. 尽量使用新鲜抗凝血。若冻存血,应避免反复冻融。
2. 解冻后2× Blood Master Mix可能出现浑浊,冰上放置1-2 min,待溶液澄清后,上下颠倒混匀,不影响试剂性能。
3. 电泳检测时,切勿使用含有 SDS 的Loading Buffer,否则在电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带,影响实验结果。
4. 建议扩增片段长度1 kb以内,以便扩增效率最佳。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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