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T 细胞亚群检测试剂盒标本制备方法!

提供者:南京亿迅生物科技有限公司   发布时间:2019/9/24 14:00:41  阅读次数:3643次  进入该公司店铺

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T 细胞亚群检测试剂盒标本制备方法!


标本制备:


取肝素抗凝(25μl/ml)的静脉血1~2ml,PBS 稀释1-2 倍后,沿装有等量淋巴细胞分离液的试管壁混匀缓慢加至液面上层,保持两种液体界面清晰,离心(2000转/分)15-20 分钟,吸取两液面交界处的单个核细胞层,加5 倍PBS,离心(1000
转/分)5 分钟,弃上清液,沉淀即为单个核细胞。

利用试管中剩余的少许回流液体(约一滴)混匀细胞,制成单个核细胞悬液。滴30μl 细胞悬液于载玻片上,静置2 分钟使细胞下沉粘附于玻片上,吸去液体,快速吹干或37℃温箱1 小时烤干。或用PBS 将单个核细胞调至2×105个/ml,离心涂片机1000 转离心1-2分钟制片,快速吹干或37℃温箱1 小时烤干。涂片前取防脱片剂5-10μl 均匀推片,亦可用棉签粘取防脱片剂均匀涂于干净玻片上,待干后制备细胞涂片,以防掉片。


T细胞是一个不均一的细胞群体,分类方法有多种.按细胞表面分化抗原(CD)的不同,可分为CD4+和CD8+两亚群;按T细胞表面受体(TCR)的不同,可分为αβT细胞γδT细胞;按功能可分为辅助性T细胞(Th 细胞)、抑制性T细胞(Ts细胞)、细胞毒T细胞(CTL或Tc细胞)和迟发型超敏反应T细胞(TDTH细胞);按对抗原应答的不同,分为初始T细胞(naive T cell)、活化的T细胞(activated T cell)和记忆性T细胞(memory T cell);以及区别于传统T细胞的NKT细胞等等


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