提供者:上海科研试剂供应商 发布时间:2019/9/6 9:53:55 阅读次数:2873次 进入该公司店铺
本产品直接以血液为模板,用抗抑制的2×Direct PCR Master Mix 进行扩增,扩增产物直接通过电泳检测。
产品特点
1.简便:无需事先对血样进行提纯,直接用血液为模板扩增目的基因;
2.高效:多数抗凝剂存在条件下,超强的抗抑制能力,能有效扩增杂质较多的模板。
适用范围
1. EDTA、肝素、柠檬酸钠抗凝方法保存的新鲜或冷冻血样;
2. 未加抗凝剂的血样和干血;
3. 血液基因组的扩增检测。
产品介绍
本试剂盒以血液为模板直接进行DNA扩增,扩增产物可直接点样电泳。该试剂盒中含有最新设计的Taq酶突变体,这些使它能够耐受全血样品中存在的抑制剂。在大多数抗凝剂存在下,包括肝素、柠檬酸和EDTA等,Taq酶依然扩增性能良好。由于其可以从血液直接进行扩增,免除了繁琐的DNA提取步骤,加快了工作流程,降低了污染的风险。
产品特点
1.简便:无需事先对血液进行提纯,直接用血液为模板扩增目的基因;
2.高效:多数抗凝剂存在条件下,超强的抗抑制能力,能有效扩增杂质较多的模板。
产品用途
1.未加抗凝剂的血液样本;
2.添加了肝素、柠檬酸、EDTA等抗凝剂的血液样本;
3.血液基因组扩增检测。
使用建议
1.使用时添加≤10%的全血为模板,若扩增不出目的条带, 酶量可加倍。加上血液后将管中各组分轻轻混匀。
2.2mM Mg2+可以满足绝大多数PCR扩增,对于某些PCR, 为了保证较好的扩增,可调
节为2-5mM。
保存温度
-20℃保存。
产品组分
产品组成 | 体积 |
2 × Direct Blood PCR Buffer(with Mg2+) | 1.25ml |
dNTPs(各10mM) | 100μl |
Direct Taq DNA聚合酶(400U) | 100μl |
使用方法
常用反应体系(25μl):
2×Direct Blood PCR Buffer(with Mg2+*) | 10μl |
上游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
下游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
dNTPs(各10mM) | 1μl |
全血 | 0.1-2.5μl |
Direct Taq DNA聚合酶(400U) | 1μl |
ddH2O | 至25μl |
*Mg2+终浓度为3.5mM
常用PCR设置
当扩增片段<3K | 当扩增片≥(推荐引物长度≥30bp) |
94℃,1分钟30秒 94℃,20秒 55-60℃,20秒 30-40循环 72℃,1kb/60秒 72℃5分钟 4℃ 保温 | 94℃,5分钟 94℃,15秒 30-40循环 68℃,1kb/60秒 72℃5分钟 4℃ 保温 |
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