实验方法原理
运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养，并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。
实验材料SD大鼠
试剂、试剂盒PBSFBSDMEM
仪器、耗材
手术剪手术钳眼科剪刀眼科镊子大头针手术刀培养皿
实验步骤
一、实验步骤
1. SD 大鼠(150-200 g)，断头，浸入75%的酒精中15 min。
2. 置入超净台中，将大鼠固定于杀鼠板上，在无菌条件下打开腹腔，分离出胸主动脉、腹主动脉， 摘出。
3. PBS 清洗3 遍，剥去外膜，用手术刀片刮去内膜，留下中膜并将其移入1 mL 的培基中、剪成1x1 mm2 大小组织块。
4. 再将PBS清洗组织块，移入25 mL 的培养瓶中，用尖嘴弯管均匀贴好组织块，放入37℃、5% CO2的培养箱倒置培养6 小时后，待组织块贴壁后，再加入2.5 mL 培养液后放回培养箱中。
5. 随后每3 天予以全量换液。
二、结果
3-5 天后可见组织块周围有细胞爬出，大约2 周后80－90%融合。
收起
注意事项
第四步中最后加入2 mL 培养液时应使其顺无组织块的皿边缘缓慢流下，勿使组织块吹下。
TC-1小鼠肺上皮细胞
EA.hy926人脐静脉内皮细胞融合细胞
MLO-Y4小鼠骨样细胞
RFL-6大鼠成纤维细胞
MIO-M1视网膜Muller干细胞
CT-26.WT小鼠结肠癌细胞
A20小鼠B细胞淋巴瘤
RENCA小鼠肾癌细胞
NCI-H2227人小细胞肺癌细胞
HCAEC人类冠状动脉内皮细胞
HCoEpiC人正常结肠上皮细胞
5-8F人鼻咽癌细胞
HGMC人肾小球系膜细胞
CCD841CoN人正常结肠上皮细胞
184A1人乳腺上皮细胞
SU-DHL-10人类B细胞淋巴瘤
MONOMAC6急性单核细胞白血病细胞
NCI-H1993人肺腺癌细胞
RTE大鼠气管上皮细胞
HCS-2/8人软骨肉瘤细胞
MN9D小鼠中脑多巴胺能神经元细胞
hRMECs人视网膜微血管内皮细胞
RGC-5小鼠视网膜神经节细胞
HPDE6-C7人正常胰腺导管上皮细胞
HIEC正常人肠上皮细胞
NCTC1469小鼠正常肝细胞
HMEC-1人微血管内皮细胞株
T98G人脑胶质细胞瘤
SNU475人肝癌细胞
Kupffer肝枯否细胞
LN-18人神经胶质瘤细胞
HIC人小肠癌细胞系
VSC4.1脊髓前角运动神经元瘤细胞系
KBM5人慢性髓白血病细胞
IMR-32人神经母细胞瘤
MLE-12小鼠肺上皮细胞
9L小鼠胶质瘤细胞
Toledo人B淋巴细胞株瘤
GES-1人胃粘膜细胞
BJAB人B细胞淋巴瘤细胞
RCHACVRCHACV细胞系
MUTZ-1细胞系
HPBALLT细胞白血病细胞
JMSU1JMSU1细细胞系
TALL-1细胞系
SKM-1人骨髓增生异常综合征细胞株
KMS28BMKMS28BM细胞
KMS34KMS34细胞
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