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实验动物（大鼠、小鼠、兔、猪）原代乳腺上皮细胞
产品编号：RAT/MIC/RAB/PIG-iCELL-f011
产品规格：>5×105 细胞数
包装规格：T-25 培养瓶
细胞详述：
乳腺位于皮下浅筋膜的浅层与深层之间。浅筋膜伸向乳腺组织内形成条索状的
小叶间隔，一端连于胸肌筋膜，另一端连于皮肤，将乳腺腺体固定在胸部的皮下组
织之中。乳房腺体由15-20 个腺叶组成，每一腺叶分成若干个腺小叶，每一腺小叶
又由10-100 个腺泡组成，这些腺泡紧密地排列在小乳管周围，腺泡的开口与小乳管
相连。
乳腺上皮细胞来源于乳腺小叶中。它们与腺体导管和脂肪组织一起在乳腺中形
成复杂的网络结构。乳腺上皮细胞在人和动物体出生、发育和妊娠中均会受荷尔蒙
调控而进行一系列的增长、迁移和分化。激素水平失调、细胞外基质的变化和其它
的基因因素都会导致乳腺上皮细胞恶性增长，最终导致乳腺癌的发生。了解乳腺上
皮细胞的特性可以帮助我们理解乳腺癌的病例机制以及为治疗确定新的靶点。
细胞特性:
1) 细胞来源于实验动物正常乳腺组织。
2) 细胞鉴定：细胞角蛋白-8（CK-8）免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式：上皮样，多角形细胞，贴壁培养。
推荐培养基：
我们推荐使用原代上皮细胞培养体系作为体外培养原代乳腺上皮细胞的培养基。
二．使用方法
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出25cm2 培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2
细胞培养箱中静置3-4 小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或
进行传代。
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2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2 培养瓶中的培养液，用PBS
清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞
回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液
转移至15ml 离心管中，1000rpm 离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml 完全培养基重悬，然后按1:2 比例进行分瓶传代，
最后放入37℃，5%CO2 细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2 培养瓶中的培养液，用PBS
清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞
回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转
移至15ml 离心管中，1000rpm 离心5min；
3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h 后转入液
氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃
水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
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2）将冻存管中的细胞移至含5ml 完全培养基的15ml 离心管中， 1000rpm 离心
5min；
3）弃上清，沉淀用5ml 完全培养基重悬，接种25cm2 培养瓶，于37℃，5%CO2
细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
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