提供者:上海喆图科学仪器有限公司 发布时间:2019/3/14 14:00:28 阅读次数:3638次 进入该公司店铺
2. 电穿孔法。通过短暂的高电场电脉冲处理细胞,沿细胞膜的电压差异会导致细胞膜的暂时穿孔。DNA被认为是穿过孔扩散到细胞内的。电脉冲和场强的优化对于成功的转染非常重要,因为过高的场强和过长的电脉冲时间会不可逆地伤害细胞膜而裂解细胞。理论上说电穿孔法可用于各种细胞,且不需要另外采购特殊试剂,但需要昂贵的电转仪。此法每次转染需要更多的细胞和DNA,因为细胞的死亡率高。每种细胞电转的条件都需要进行多次优化。
3. 病毒介导的感染。感染需要将目的基因克隆到特定的病毒体系中,经过包装细胞的包装得到改造后的病毒,再进行感染。优点是转染效率特别高,尤其是难以转染的原代细胞、活体细胞。缺点是构建病毒周期长,环节多,易出错,费用也高。
4,非脂质体转染 。最新的纳米聚合物转染试剂,如Entranster试剂,纳米材料,细胞毒性小,转染效率高,渐渐成为各大实验室的首选转染试剂。
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