使用恒温培养箱进行乳糖发酵实验

乳糖发酵( Lactose Fermentation Experiment ) 是常用的鉴别微生物的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要，是初步鉴定肠道致病菌与非致病菌常用的试验。应用于食品，环境行业比较多.下面小编给大家介绍一下乳糖检测的实验方法，供大家参考

一、乳糖发酵实验

1、取10ml水样接种到10ml双料乳糖蛋白胨培养液中，取1ml水样接种到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中，另取1ml水样注入到9ml灭菌生理盐水中，混匀后吸取1ml（即0.1ml水样）注入到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中，每一稀释度接种5管。对已处理过的出厂自来水，需经常检验或每天检验一次的，可直接种5份10ml水样双料培养基，每份接种10ml水样。

2、检验水源水时，如污染较严重，应加大稀释度，可接种1，0.1，0.01ml甚至0.1，0.01，0.001ml，每个稀释度接种5管，每个水样共15管。接种1ml以下水样时必须作10倍递增稀释后，取1ml接种，每递增稀释一次，换用1支1ml灭菌刻度吸管。

3、将接种管置36±10℃恒温培养箱内，培养24h±2h，如所有乳糖蛋白胨培养管都不产气产酸，则可报告为总大肠菌群阴性，如有产酸产气者，则按下列步骤进行。

二、分离培养：经培养24h后，将产酸产气的发酵管，分别接种于伊红美蓝平板上，36±10℃愠温培养8h-24h，观察形态，挑取数个可疑菌落进行涂片、革兰氏染色、镜检。

三、证实试验：挑取可疑管接种乳糖蛋白胨培养液中，置于36±10℃恒温培养箱中培养24h±2h，有产酸产气者，即证实有总大肠菌群存在。