自备材料:
1、 载玻片
2、 显微镜
操作步骤(仅供参考):
1、 血液、骨髓或细胞涂片滴加预冷的BFA固定液,4℃固定30~60s,稍水洗。
2、 滴加配制好的 POX 孵育液,室温(20~25℃)避光孵育 10~15min,水洗 2min。
3、 滴加 WG 染色液,孵育 30~60s。
4、 直接滴加等量 WG buffer,染色 10~15min。
5、 水洗、晾干、镜检。
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染色结果:
POX 活性部位 棕黄色
细胞核 蓝色
粒细胞系除早期原粒细胞阴性外,分化好的原粒细胞以下阶段细胞随细胞成熟而阳性反应增强,衰老中性粒细胞反应程度减弱单核细胞系弱阳性,淋巴细胞系为阴性。浆细胞及巨核细胞均为阴性。
嗜酸性粒细胞和 Auer 小体呈强阳性反应。
临床意义:
1、 急性粒细胞白血病晚期的原粒细胞呈阳性,颗粒较少且大。
2、 急性单核白血病细胞呈阴性或弱阳性,颗粒小且稀疏。
3、 单核急性白血病呈阴性或弱阳性。
4、 急性早幼粒白血病呈强阳性,某些早幼粒细胞呈阳性,恶性组织细胞呈阴性。
5、 急性淋巴细胞白血病呈阴性。
注意事项:
1、 血液或骨髓涂片应新鲜,薄厚适宜,及时固定,否则会影响酶的活性。
2、 POX孵育液易失效或降低阳性强度,即配即用,不宜久置。
3、 样本在未染色前切勿接触氧化剂类物质,以免细胞内的过氧化物酶被抑制。
4、 每次染色时,应采取健康人末梢血或骨髓涂片作为阴性对照。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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