SK-N-BE(2)（人神经母细胞瘤细胞）【通过STR鉴定】_分析方法_仪器仪表技术文献

SK-N-BE(2)（人神经母细胞瘤细胞）【通过STR鉴定】

提供者：上海信裕生物科技有限公司发布时间：2018/5/28 17:59:45 阅读次数：4960次进入该公司店铺

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SK-N-BE(2)（人神经母细胞瘤细胞）【通过STR鉴定】

规格：1×10⁶cells/T25培养瓶

细胞名称	SK-N-BE(2)（人神经母细胞瘤细胞）
种属	人
年龄（性别）	男；2岁
组织来源	脑；神经母细胞瘤，骨髓转移灶
生长特性	贴壁/悬浮
细胞形态	神经母细胞样
背景描述	SK-N-BE(2)神经母细胞瘤细胞株是于1972年11月从一位多次化疗及放疗的扩散性神经母细胞瘤患儿骨髓穿刺物中建立的；SK-N-BE(2)细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性。有报道称，SK-N-BE(2)细胞的饱和浓度超过1×10^6细胞/cm^2。SK-N-BE(2)细胞形态多样，有的有长突触、有的呈上皮细胞样；SK-N-BE(2)细胞会聚集，形成团块并浮起。
生长培养基	MEM/F12＋10% FBS＋1% P/S
培养条件	气相：空气，95%；CO₂，5% 温度：37℃

一、复苏
1.把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后（大概1-1.5分钟），拿出来喷点酒精放到超净工作台里。
2.把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中（用培养基把冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗下来），1000转离心5分钟。
3.把上清液倒掉，加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动，使培养皿中的细胞均匀分布。
4.标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴壁后换培养基。
5.3天换一次培养基。
二、传代
1.培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。
2.把原有培养基吸掉。
3.加适当的胰蛋白酶（能覆盖细胞就行），消化1-2分钟。
4.细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。
5.用移液枪吹打细胞，把细胞都悬浮起来。
6.把细胞吸到15ml的离心管中，1000转离心5分钟。
7.倒掉上清液，加1-2ml培养基，把细胞都吹起来。
8.根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般，癌细胞分5个，正常细胞传3个。继续培养。
三、冻存
把细胞消化下来并离心（同上）。用配好的冻存液把细胞悬浮起来，分装到灭菌的冻存管中，静止几分钟，写明细胞种类，冻存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃过夜，然后放到液氮灌中保存。
冻存液的配制： 70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。
要注意的就是无菌操作！