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人促甲状腺激素FSHRIA代测检测方法!

提供者:南京亿迅生物科技有限公司   发布时间:2018/3/15 10:34:14  阅读次数:3708次  进入该公司店铺

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人促甲状腺激素FSHRIA代测检测方法!

使用目的:
用于样本中促甲状腺激素(TSH)的定量测定

实验原理
:
促甲状腺激素(TSH)是含 211 个氨基酸的糖蛋白类激素,分子量约为 28,000D,由α 和β两个亚基组成。TSH 主要受下丘脑分泌的促甲状腺激素释放激素(TRH)和血液中游离 的甲状腺激素(T3、T4)的调节。TRH 可促进 TSH 的分泌,T3、T4对 TSH 的分泌起负反馈 调节作用。另外,下丘脑分泌的生长激素释放抑制激素(SS)和肾上腺皮质分泌的糖皮质 激素可降低 TSH 的分泌,而雌激素可增加其分泌。 本品采用了第二抗体+聚已二醇沉淀法放射免疫分析试验原理:含促甲状腺激素(TSH)的样 品和 125I 标记的促甲状腺激素(TSH)与相应的抗体反应形成抗原抗体复合物。反应后加入二 抗及 PEG,使免疫复合物沉淀,离心,测沉淀放射性计数。通过曲线得到样本中促甲 状腺激素(TSH)的浓度。

样本要求:
110 微升样本。 采静脉血 5ml 于塑料试管中,静置使其凝固后,1500 转/分离心,取其上清液,放置玻 璃瓶中。如果样本不立即使用,可在-18℃~-25℃储存 6 个月。 严重溶血、高浓度的脂类、胆红素对测定结果有影响。

操作方法:
1、 将实验所需试剂及样本放置室温,平衡至少 30 分钟以上才可进行操作; 2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管进行编号,所有实验均做双管重复; 3、 取每个浓度的品、质控血清和样本 200µl 加入相应编号的试管中; 4、 除 T、NSB 管外,每管均各加入 200µl 抗体工作液,充分混匀; 5、 37℃温育 1.5 小时; 6、 每管均各加入 200µl 标记物工作液,充分混匀; 7、 37℃温育 1 小时; 8、 每管均各加入 500µl 分离剂后,充分混匀; 9、 离心 3500 转/分,20 分钟后,吸去或倾倒掉上清液; 10、 用 γ-计数器测定每管 1 分钟的放射性强度计数; 11、 从曲线上读取样本及质控血清的浓度。


实验过程中需要注意:
实验过程中应注意] 1、 γ-计数器本底计数应≤100CPM/分,效率应≥75%; 2、 加入放射性标记物时,应做好防护、小心谨慎,以避免造成放射性污染; 3、 如果某一个样本的测定值高于高浓度的品浓度,用零品以 1:2 或 1: 4 的比例稀释样本后重新测试,测试结果乘以相应的稀释倍数。

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