如今的科研事业应用广泛，实验室的试剂范围也越来越广。上海恒远技术员根据科研应用对2018年ELISA二抗进行了分析探讨。

分析一：实验室二抗主要的应用
可以应用到几乎所有类型的免疫检测中，尤其是Westernblot、免疫组织化学和免疫细胞化学。事实上，二抗在ELISA及流式细胞术中应用也很广泛，不仅用于科学研究，而且广泛的应用于临床分析和疾病诊断。比较而言，二抗在免疫沉淀中的应用相对较少。以下内容是基于对所收集的二抗信息进行统计分析后得出的一些结论，对于您在具体的实验中如何选择最适合的抗体具有借鉴作用。

分析二：如何正确的选择二抗
① 考虑因素：有一抗的物种、产生二抗的宿主、一抗的类别或亚类、二抗所耦联的探针类型及二抗的形式等等。因此选择哪种类型的二抗很大程度上决定于您所使用的一抗是什么，尤其针对种属和类别而言。
② 与一抗的联系：通常情况下，一抗可以在山羊、小鼠、兔子、大鼠及绵羊体内制备，其中属小鼠及兔子最为常见，相应的，二抗的种属也应当与一抗的相一致。而对于制备二抗的宿主，则应选择另外一种不同的动物，一般选用驴、山羊、兔子、绵羊或其他较大的动物，可以实现二抗的大规模制备，其中又属山羊使用最多。
③ 二抗类别或亚类的选择：应遵循与一抗类别或亚类相一致的原则，其中抗IgG使用最多。这可能是因为除了五种类别的单克隆抗体外，很多一抗是多克隆抗体，属于IgG类免疫球蛋白。此外anti-IgG可以识别几乎所有类型的IgG亚类，因此，在不清楚一抗是属于那个类别或亚类的时候，anti-IgG抗体是个不错的选择。


此外，整个IgG分子是最常用的一种二抗分子形式，而F (ab’) 2片段或Fab片段一般仅用于特殊实验中，如需要避免抗体与具有Fc受体的细胞结合的情况，或需要封闭内源性免疫球蛋白的时候。

由于ELISA二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以应用广泛。对于二抗所耦联的探针的选择，主要取决于具体的实验。对于Western blot，最常用的探针是HRP。

抗体简介
第一抗体
第一抗体就是能和非抗体性抗原（特异性抗原）特异性结合的蛋白。种类包括单克隆抗体和多克隆抗体。

第二抗体
第二抗体是能和抗体结合，即抗体的抗体，其主要作用是检测抗体的存在，放大一抗的信号。二抗是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质，去免疫异种动物，由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。用抗AIV H5亚型血凝素单克隆抗体为包被抗体,兔抗AIV IgG为第二抗体。

区别
第一抗体就是平常所说的抗体，即能和抗原特异性结合。第二抗体是能和抗体结合的，即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。一抗是针对抗原的抗体，二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说，抗原进入机体刺激机体免疫系统产生免疫应答，由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团，而且一抗可以至少结合两种其他基团（底物和二抗）。
一抗：可以特异结合底物，就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。二抗：可以和一抗结合，并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），则不需要二抗。但这样成本很高，因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记，再来检测一抗。而一抗识别底物。这样，当一抗结合到底物上，就可以通过二抗检测出来。